Fluocinolone acetonideは、歯髄細胞の増殖とミネラル化を促進する

Fluocinolone acetonide promotes the proliferation and mineralization of dental pulp cells.

抄録

はじめに:

本研究の目的は，ステロイドである fluocinolone acetonide がヒト歯髄細胞（DPC）の増殖と鉱化に対して果たす役割を検討することであった．また，フルオシノロンアセトニドが修復象牙質の形成および損傷歯髄の回復に及ぼす潜在的な影響について評価した．

INTRODUCTION: The aim of this study was to investigate the role of the steroid fluocinolone acetonide on the proliferation and mineralization of human dental pulp cells (DPCs). The potential effect of fluocinolone acetonide on reparative dentin formation and the recovery of injured dental pulp were evaluated.

方法:

フルオシノロンアセトニドのDPCに対する増殖効果は，cholecystokinin octapeptide assayおよびフローサイトメトリーにより解析した。フルオシノロンアセトニドの鉱化作用は，ALP組織化学染色，ALP活性，免疫染色，アリザリンレッド染色，逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応を用いてアルカリホスファターゼ（ALP），骨シアルプロテイン，オステオカルシンなどの鉱化関連バイオマーカーを検出することにより検討された．また、Dentin sialophosphoproteinやWnt4など、鉱化過程に関与する分子をreal-time polymerase chain reactionとWestern blot analysisで検出した。

METHODS: The proliferative effect of fluocinolone acetonide on DPCs was analyzed by cholecystokinin octapeptide assay and flow cytometry. The mineralized effect of fluocinolone acetonide was investigated by the detection of mineralization-related biomarkers including alkaline phosphatase (ALP), bone sialoprotein, and osteocalcin by using ALP histochemical staining, ALP activity, immunostaining, alizarin red staining, and reverse-transcriptase polymerase chain reaction. The molecules, including dentin sialophosphoprotein and Wnt4, involved in the process of mineralization were detected by real-time polymerase chain reaction and Western blot analysis.

結果:

低濃度のフルオシノロンアセトニド（0.1～40μmol/L）は、DPCの増殖を促進した。フローサイトメトリーの結果、フルオシノロンアセトニドを1および10μmol/Lでそれぞれ48時間処理すると、DPCのCD146陽性サブポピュレーションが有意に増加することが示された。フルオシノロンアセトニド処理DPCでは、無処理対照群に比べ、初期ミネラル化マーカーALPのメッセンジャーRNA発現と活性が明らかに上昇し、中期のミネラル化マーカー骨サイアロータンパク質と後期のミネラル化マーカーオステオカルシンも同様であった。一方、Wnt4と象牙質特異的マーカーであるdentin sialophosphoproteinは、fluocinolone acetonideにより未処置の対照群と比較して明らかに発現が増加した。

RESULTS: Low concentrations of fluocinolone acetonide (0.1-40 μmol/L) promoted the proliferation of DPCs. The flow cytometry results showed that the CD146-positive subpopulation of DPCs was significantly increased after treatment with fluocinolone acetonide at 1 and 10 μmol/L for 48 hours, respectively. The messenger RNA expression and activity of the early-stage mineralization marker ALP were evidently increased in fluocinolone acetonide-treated DPCs compared with the untreated control group, so did the middle-stage mineralization marker bone sialoprotein and the late-stage mineralization marker osteocalcin. Meanwhile, Wnt4 and the dentin-specific marker dentin sialophosphoprotein were obviously up-regulated by fluocinolone acetonide compared with the untreated controls.

結論:

Fluocinolone acetonideは、DPCの増殖を促進し、特にCD146+サブポピュレーションを促進することができる。Fluocinolone acetonideはDPCの鉱化を開始させることができ、損傷した歯髄組織の修復に潜在的な役割を果たすと思われる。

CONCLUSIONS: Fluocinolone acetonide can promote the proliferation of DPCs, especially for the CD146+ subpopulation. Fluocinolone acetonide can initiate the mineralization of DPCs and has the potential role in repairing injured pulp tissues.