S-パルミトイル化タンパク質の動的ラジオラベリング

Dynamic Radiolabeling of S-Palmitoylated Proteins.

• Laurence Abrami
• Robin A Denhardt-Eriksson
• Vassily Hatzimanikatis
• F Gisou van der Goot

抄録

タンパク質は、合成中に、典型的にはS-システイン/メチオニン(S-Cys/Met)を用いて、または合成後に、放射性標識された翻訳後修飾を加えることによって、放射性標識することができます。ここでは、タンパク質のS-パルミトイル化およびその動態をH-パルミチン酸標識によってモニターする方法、およびタンパク質の生合成およびターンオーバーにおけるS-パルミトイル化の重要性をS-Cys/Metパルスチェイス代謝標識を用いて調査する方法について説明する。タンパク質には複数のパルミトイル化部位が存在することが多い。本研究では、パルミトイル化部位が複数存在することが、代謝標識実験のデザインや解釈に与える影響について議論する。

Proteins can be radiolabeled either during synthesis, typically using S-cysteine/methionine (S-Cys/Met), or after synthesis, by adding a radiolabeled posttranslational modification. Here we describe how protein S-palmitoylation, and its dynamics, can be monitored by H-palmitate labeling and how the importance of S-palmitoylation in protein biogenesis and turnover can be investigated using S-Cys/Met pulse-chase metabolic labeling. Proteins frequently have multiple palmitoylation sites. The importance thereof on the design and interpretation of metabolic labeling experiments is discussed.