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Salivary Scavenger and Agglutinin (SALSA) Is Expressed in Mucosal Epithelial Cells and Decreased in Bronchial Epitheum of Asthmatic Horses（唾液スカベンジャーとアグルチニン（SALSA）は粘膜上皮細胞で発現し、喘息馬の気管支上皮で減少しています
Salivary Scavenger and Agglutinin (SALSA) Is Expressed in Mucosal Epithelial Cells and Decreased in Bronchial Epithelium of Asthmatic Horses.
PMID: 31850379 PMCID: PMC6896824. DOI: 10.3389/fvets.2019.00418.
抄録
Salivary Scavenger and Agglutinin（SALSA）タンパク質は、炎症や組織リモデリングの調節を含む様々な機能を持つ自然免疫タンパク質である。重度の馬の喘息（SEA）を対象としたトランスクリプトーム研究では、喘息馬の気管支上皮におけるSALSAをコードする遺伝子の発現が非喘息馬と比較して低下していることが示された。本研究の目的は、馬の組織におけるSALSAの発現を免疫組織化学（IHC）で解析し、喘息馬と非喘息馬の上皮遺伝子発現の潜在的な違いを検証し、馬のSALSAの構造を評価することである。SALSAに対する抗体は、免疫沈降、質量分析、ウェスタンブロッティングにより、馬のタンパク質を認識することが確認された。この抗体を4頭の馬の22の組織を含む組織マイクロアレイ（TMA）に適用した。定量PCRアッセイは、内視鏡的気管支生検からのcDNAをソース材料として使用して、喘息チャレンジの前後で、6頭の喘息馬と6頭の非喘息馬の間でSALSAに関する遺伝子発現を比較するように設計された。10頭の馬の気管支生検から得られた遺伝子を増幅・配列決定し、タンパク質構造を特徴づけるために翻訳した。気管、気管支、気管支、気管支、胃、小腸、膀胱の粘膜表面、膵臓、唾液腺管、子宮腺上皮でSALSAの免疫染色が検出された。染色は十二指腸、唾液腺の間葉管とデミルン細胞で最も強く染色された。SALSAは上皮細胞の細胞質の先端領域に集中しており、分泌されたタンパク質を示唆していた。喘息馬では非喘息馬に比べて遺伝子発現が有意に低かった（＝0.031）。馬のSALSAは、3〜5個のスカベンジャー受容体システインリッチ（SRCR）ドメイン、2個のCUB（C1r/C1s、uegf、bmp-1）ドメイン、および1個のZona Pellucidaドメインから構成されていた。これらのドメインは、自然免疫に関与するリガンドの結合を媒介する。SRCRドメインの数は、異なる馬で同定され、異なるアイソフォームを示していた。要約すると、馬のSALSAは粘膜部位への偏向性を有し、複数のアイソフォームを有し、喘息馬では発現が減少しており、馬の喘息における自然免疫の変化を示唆している。
The Salivary Scavenger and Agglutinin (SALSA) protein is an innate immune protein with various alleged functions, including the regulation of inflammation and tissue remodeling. Transcriptomic studies of severe equine asthma (SEA) showed downregulation of the gene encoding SALSA in bronchial epithelium of asthmatic compared to non-asthmatic horses. This study aimed to characterize expression of SALSA in equine tissues by immunohistochemistry (IHC), corroborate potential differences in epithelial gene expression between asthmatic and non-asthmatic horses, and assess the structure of equine SALSA. An antibody against SALSA was validated through immunoprecipitation followed by mass spectrometry and Western blotting to recognize the equine protein. This antibody was applied to tissue microarrays (TMAs) containing 22 tissues each from four horses. A quantitative PCR assay was designed to compare gene expression for SALSA between six asthmatic and six non-asthmatic horses, before and after an asthmatic challenge, using cDNA from endoscopic bronchial biopsies as source material. The gene from bronchial cDNA samples of 10 horses, was amplified and sequenced, and translated to characterize the protein structure. Immunostaining for SALSA was detected in the mucosal surfaces of the trachea, bronchi, bronchioles, stomach, small intestine and bladder, in pancreatic and salivary gland ducts, and in uterine gland epithelium. Staining was strongest in the duodenum, and the intercalated ducts and Demilune cells of the salivary gland. SALSA was concentrated in the apical regions of the epithelial cell cytoplasm, suggestive of a secreted protein. Gene expression was significantly lower ( = 0.031) in asthmatic compared to non-asthmatic horses. Equine SALSA consisted of three to five scavenger receptor cysteine-rich (SRCR) domains, two CUB (C1r/C1s, uegf, bmp-1) domains and one Zona Pellucida domain. These domains mediate the binding of ligands involved in innate immunity. Varying numbers of SRCR domains were identified in different horses, indicating different isoforms. In summary, equine SALSA has a predilection for mucosal sites, has multiple isoforms, and has decreased expression in asthmatic horses, suggesting alterations in innate immunity in equine asthma.
Copyright © 2019 Lee, Tessier and Bienzle.