MCF-7 細胞における 6-チオグアニンの DNMT1 活性のサイレンシングを介した腫瘍抑制経路のトランスクリプトーム解析

Transcriptomics Analysis of the Tumor-Inhibitory Pathways of 6-Thioguanine in MCF-7 Cells via Silencing DNMT1 Activity.

• Hao Li
• Xinglan An
• Daoyu Zhang
• Qi Li
• Nan Zhang
• Hao Yu
• Ziyi Li

抄録

背景:

6-チオグアニン（6-TG）は、急性白血病の治療薬として古くから使用されてきた薬剤であり、幅広い抗腫瘍作用を有することが証明されています。本研究は、MCF-7乳がん細胞株（ER+、PR+）における6-TGの隠れた機能とそのメカニズムを調べるために作成されました。

Background: 6-thioguanine (6-TG), as a conventional "ancient" drug for the treatment of acute leukemia, has been proved to have extensive anti-tumor roles. This study was created to investigate the hidden function of 6-TG on the MCF-7 breast cancer cell line (ER+, PR+) and its mechanisms.

方法:

MCF-7細胞を6-TGで処理し、セルカウンティングキット-8アッセイによりIC50値を測定した。RNA-seq解析により分化発現遺伝子（DEG）を確認した。アポトーシスと細胞周期の影響はフローサイトメトリーとウエスタンブロット解析により決定した。

Methods: MCF-7 cells were treated with 6-TG, and the IC50 value was measured by a cell counting kit-8 assay. Differentially expressed genes (DEGs) were confirmed by RNA-seq analysis. Apoptosis and cell cycle consequences were determined by flow cytometry and Western blot analyses.

結果:

その結果、6-TG処理後はコロニー形成が著しく減少し、細胞のアポトーシスの割合が増加した。また、DNMT1 mRNAおよびタンパク質発現は減少し、FAS発現は増加した。さらに、6-TG は MCF-7 細胞の G2/M 期細胞周期停止を誘導し、CDKN1A (p21) の発現を上昇させた。

Results: The results showed that colony formation decreased markedly and the percentage of cell apoptosis increased after 6-TG treatment. DNMT1 mRNA and protein expression decreased, and FAS expression increased. Moreover, 6-TG also induced MCF-7 cells to undergo G2/M phase cell cycle arrest and upregulated CDKN1A (p21).

結論:

以上の結果から、6-TG は、MCF-7 乳癌細胞において DNMT1 の活性を阻害することで、FAS 介在性外因性アポトーシスと p21 依存性の G2/M 期停止を誘導する可能性が示唆された。

Conclusion: Overall, our results suggest that 6-TG may induce FAS-mediated exogenous apoptosis and p21-dependent G2/M arrest by inhibiting the activity of DNMT1 in MCF-7 breast cancer cells.

© 2020 Li et al.