Bam32/DAPP1依存性好中球活性酸素種のWKYMVm誘発微小血管過疎性

Bam32/DAPP1-Dependent Neutrophil Reactive Oxygen Species in WKYMVm-Induced Microvascular Hyperpermeability.

• Li Hao
• Aaron J Marshall
• Lixin Liu

抄録

ホスホチロシンと3-ホスホイノシチド1のデュアルアダプター（DAPP1）として知られる32 kDaのB細胞アダプター分子（Bam32）は、炎症時のリンパ球増殖とリクルートの制御に関与していることが知られている。しかし、炎症時の好中球におけるその役割は未だ不明である。我々は、生体内顕微鏡を用いて、ホルミルペプチド受容体アゴニストWKYMVm誘導による毛細血管後静脈の透過性変化におけるBam32の役割を調べ、Bam32欠損マウス（Bam32）と野生型（WT）対照マウスのクレマスター筋における好中球の接着と遊走を同時に評価した。その結果、Bam32マウスではWKYMVm誘導性の微小血管過透過性が有意に低下し、それに伴って好中球の遊走が顕著に減少した。また、Bam32マウスのWKYMVm誘発性血管拡張能の低下は好中球依存性であることが骨髄移植キメラマウスで確認された。また、好中球におけるWKYMVm誘導性活性酸素種（ROS）の細胞内および細胞外産生には、Bam32が決定的に必要であることを発見した。活性酸素を薬理学的に消去することで、Bam32マウスとWTマウスのWKYMVm誘発性過疎化の違いは解消された。Bam32の欠損は好中球におけるWKYMVm誘導性のERK1/2を減少させたが、p38やJNKのリン酸化は減少しなかった。また、ERK1/2シグナル伝達カスケードを阻害することで、WTマウスの好中球におけるWKYMVm誘発性活性酸素の発生と微小血管過疎化が抑制された。結論として、好中球におけるBam32依存性、ERK1/2による好中球の活性酸素発生が、好中球リクルート時のWKYMVm誘導性微小血管過透過性に重要であることが明らかになった。

B cell adaptor molecule of 32 kDa (Bam32), known as dual adapter for phosphotyrosine and 3-phosphoinositides 1 (DAPP1), has been implicated in regulating lymphocyte proliferation and recruitment during inflammation. However, its role in neutrophils during inflammation remains unknown. Using intravital microscopy, we examined the role of Bam32 in formyl peptide receptor agonist WKYMVm-induced permeability changes in post-capillary venules and assessed simultaneously neutrophil adhesion and emigration in cremaster muscles of Bam32-deficient (Bam32) and wild-type (WT) control mice. We observed significantly reduced WKYMVm-induced microvascular hyperpermeability accompanied by markedly decreased neutrophil emigration in Bam32 mice. The Bam32-specific decrease in WKYMVm-induced hyperpermeability was neutrophil-dependent as this was verified in bone marrow transplanted chimeric mice. We discovered that Bam32 was critically required for WKYMVm-induced intracellular and extracellular production of reactive oxygen species (ROS) in neutrophils. Pharmacological scavenging of ROS eliminated the differences in WKYMVm-induced hyperpermeability between Bam32 and WT mice. Deficiency of Bam32 decreased WKYMVm-induced ERK1/2 but not p38 or JNK phosphorylation in neutrophils. Inhibition of ERK1/2 signaling cascade suppressed WKYMVm-induced ROS generation in WT neutrophils and microvascular hyperpermeability in WT mice. In conclusion, our study reveals that Bam32-dependent, ERK1/2-involving ROS generation in neutrophils is critical in WKYMVm-induced microvascular hyperpermeability during neutrophil recruitment.

Copyright © 2020 Hao, Marshall and Liu.