ビスフェノールA曝露後のラット腎臓細胞におけるグローバルDNAメチル化とプロモーターのハイパーメチル化

Global DNA Hypomethylation and and Promoter Hypermethylation in Rat Kidney Cells after Bisphenol A Exposure.

• Pınar TuzcuoĞlu
• Sibel Özden

抄録

目的:

ビスフェノールA（BPA）は、ポリカーボネートの製造に使用される合成モノマーであり、内分泌かく乱作用を有する環境汚染物質である。プラスチック担体からのBPAの放出は、多量の曝露を引き起こし、結果として人や環境の健康へのリスクが高いと考えられている。

Objectives: Bisphenol A (BPA) is a synthetic monomer used in the production of polycarbonate and an environmental contaminant with endocrine disrupting properties. BPA release from plastic carriers is thought to cause high amounts of exposure, which result in high risk to human and environment health.

材料と方法:

ラット腎臓上皮細胞（NRK-52E）を用いて、BPA曝露前後のグローバルDNAメチル化、CpGプロモーターDNAメチル化、遺伝子発現の変化の可能性を調べた。

Materials and Methods: The study examined the possible changes in global DNA methylation, CpG promoter DNA methylation, and gene expressions of and after BPA exposure in rat kidney epithelial cells (NRK-52E).

結果:

NRK-52E 細胞における BPA の IC 値は，3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-イル)-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミド（MTT）試験およびニュートラルレッド取り込み試験において，それぞれ 133.42 μM および 101.74 μM であった．細胞を１ｎＭ、１０ｎＭ、１００ｎＭ、１μＭ、１００μＭ濃度で２４時間、１００ｎＭ濃度で２４日、４８日、７２日、９６日、および６日間、ＢＰＡで処理した。100 nMのBPA濃度では、48, 72, 96 h, 6日後にグローバルな5-メチルシトシンレベルの低下が観察された。CpG プロモーターの DNA メチル化の変化は、BPA 処理した NRK-52E 細胞の遺伝子とその中で検出された。BPAへの100 nM曝露は48、72、96時間後に遺伝子発現を変化させたのに対し、24時間後の高濃度でのBPAへの反応では発現レベルが変化し、それに応じて変化した。

Results: The IC values of BPA in NRK-52E cells were 133.42 and 101.74 μM in the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and neutral red uptake tests, respectively. The cells were treated with BPA at 1 nM, 10 nM, 100 nM, 1 μM, and 10 μM concentrations for 24 h and at 100 nM concentration for 24, 48, 72, 96 h, and 6 days. Decreased global 5-methylcytosine levels were observed after 48, 72, 96 h, and 6 days at the concentration of 100 nM BPA. Changes in CpG promoter DNA methylation were detected in the genes of and in BPA-treated NRK-52E cells. Expression levels of and changed in response to BPA at the high concentrations after 24 h treatment, whereas 100 nM exposure to BPA altered gene expression after 48, 72, and 96 h.

結論:

これらの結果は，腎細胞におけるBPA毒性のメカニズムにおいて，グローバルおよび遺伝子特異的なDNAメチル化の変化が重要な役割を果たしている可能性を示唆している．

Conclusion: These results indicate that changes in global and gene-specific DNA methylation may play an important role in the mechanism of BPA toxicity in kidney cells.

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