日本語AIでPubMedを検索
ロングノンコーディングRNA（lncRNA）小核球RNA宿主遺伝子15（SNHG15）は、細胞外マトリックスのホメオスタシスを制御することで変形性関節症の進行を緩和する
Long Non-Coding RNA (lncRNA) Small Nucleolar RNA Host Gene 15 (SNHG15) Alleviates Osteoarthritis Progression by Regulation of Extracellular Matrix Homeostasis.
PMID: 32643707 DOI: 10.12659/MSM.923868.
抄録
背景 マイクロRNA（miRNA）のおとりとしての長いノンコーディングRNA（lncRNA）が変形性関節症（OA）の進行に関与していることを示唆するエビデンスが増えているが、OAにおけるlncRNA SNHG15の潜在的なメカニズムは不明のままである。そこで本研究では、変形性関節症の進行におけるSNHG15の分子機構を明らかにすることを目的とした。本研究では、OAの軟骨細胞を20ng/mlのIL-1ß刺激により作製し、実験的OAモデルとして、内側メニスカス（DMM）手術による不安定化を行った。軟骨の組織形態をサフラニンとファストグリーン二重染色で観察した。SNHG15とmiR-7、KLF4、miR-7との関係は、デュアルルシフェラーゼアッセイまたはRNA免疫沈降法（RIP）により決定した。免疫蛍光を用いて、Ki67、コラーゲンII、アグレカンの発現を検出した。さらに、SNHG15、miR-7、KLF4、MMP3、ADAMTS5、COL2A1、Aggrecanおよびß-カテニンの発現をqRT-PCRまたはウェスタンブロットで評価した。SNHG15 プロモーターのメチル化状態は MS-PCR により評価した。結果 ヒトOA膝軟骨組織およびIL-1ß刺激OA軟骨細胞において、KLF4およびSHNG15の発現低下およびmiR-7の過剰発現が認められた。SHNG15の過剰発現は、ECMの分解を有意に抑制し、OA軟骨細胞の軟骨形成を促進した。さらに、SNHG15はmiR-7をスポンギングすることでKLF4の発現を制御していた。さらに解析したところ、SNHG15はOA軟骨細胞においてb-カテニンを有意に阻害することがわかった。また、SNHG15は正常軟骨組織よりもヒトOA組織の方がメチル化レベルが高かった。結論 SNHG15 は ECM の恒常性を調節することで OA の進行を緩和し、OA 治療の有望なターゲットとなることが明らかになった。
BACKGROUND Growing evidence suggests that long non-coding RNAs (lncRNAs), as decoys of microRNAs (miRNAs), are involved in osteoarthritis (OA) progression, but the potential mechanism of lncRNA SNHG15 in OA remains unknown. Thus, the present study explored the molecular mechanism of SNHG15 in OA progression. MATERIAL AND METHODS OA chondrocytes were created by 20 ng/ml IL-1ß stimulation, and the experimental OA model was created by destabilization of the medial meniscus (DMM) surgery. Cartilage histomorphology was observed by safranin and fast green double dyeing. The relationships between SNHG15 and miR-7, KLF4, and miR-7 were determined by dual-luciferase assay or RNA immunoprecipitation (RIP). Immunofluorescence was used to detect the expressions of Ki67, collagen II, and Aggrecan. Moreover, SNHG15, miR-7, KLF4, MMP3, ADAMTS5, COL2A1, Aggrecan, and ß-catenin expressions were assessed by qRT-PCR or Western blot. The methylation status of SNHG15 promoter was evaluated by MS-PCR. RESULTS Underexpression of KLF4 and SHNG15 and overexpression of miR-7 were found in human OA knee cartilage tissues and IL-1ß-stimulated OA chondrocytes. SHNG15 overexpression significantly inhibited ECM degradation and promoted chondrocyte formation of OA chondrocytes. Furthermore, SNHG15 regulated KLF4 expression by sponging miR-7. Further analysis found that SNHG15 significantly inhibited b-catenin in OA chondrocytes. SNHG15 had a higher level of methylation in human OA tissues than in normal cartilage tissues. CONCLUSIONS Our results revealed that SNHG15 alleviated OA progression by regulating ECM homeostasis, which provides a promising target for OA therapy.