赤血球あたりの胎児ヘモグロビン定量により、鎌状赤血球症における保護閾値を決定することができる

Fetal hemoglobin quantification per red blood cell allows to determine protective thresholds in sickle cell disease.

• Nicolas Hebert
• Marie Georgine Rakotoson
• Gwellaouen Bodivit
• Etienne Audureau
• Laura Bencheikh
• Laurent Kiger
• Nadia Oubaya
• Sadaf Pakdaman
• Mehdi Sakka
• Gaetana Di Liberto
• Philippe Chadebech
• Benoit Vingert
• France Pirenne
• Frédéric Galactéros
• Marie Cambot
• Pablo Bartolucci

抄録

鎌状ヘモグロビン（HbS）の重合は、遺伝性血液疾患である鎌状赤血球症（SCD）の重要な決定要因である。胎児ヘモグロビン（HbF）は、HbS の細胞内濃度を低下させ、その重合を阻害することで、病気の重症度の主要な調節因子となっています。しかし、SCDではHbFの異細胞分布が一般的である。HbSの重合を阻害するためには、「赤血球あたりのHbF（HbF/RBC）閾値」という仮説に基づき、個々の赤血球中のHbFを正確に測定する必要がある。これまでのところ、HbFの検出方法は、HbFを含む赤血球集団、すなわち可変性のあるF細胞の定性測定に限られていた。我々は、個々のRBCにおけるHbF定量のための正確な方法を開発しました。抗Human-HbF抗体を用いたフローサイトメトリーによる平均HbF含有量と平均RBC蛍光との間の直線的な関連が、均質なHbF分布を示す非SCD被験者から得られました。この相関関係を利用して、HbF/RBCを測定した。ヒドロキシウレア（HU）は、主にHbF合成を誘導する能力を介して、SCDの臨床症状を改善します。HbF分布は、HU投与前および投与中の14人のSCD患者において分析された。2 pg未満のHbF/RBCを含むRBC集団の有意な減少が観察された。この量は、in vitro脱酸素処理後の鎌状赤血球のレベルと相関していた。この新しい方法は、HbF/RBC分布の比較を可能にし、ベースライン患者のHbF分布とHbF誘導剤への治療応答を特徴づけるための有用なツールとなり得る。この記事は著作権で保護されています。すべての権利を保有しています。

Polymerization of the sickle hemoglobin (HbS) is a key determinant of sickle cell disease (SCD), an inherited blood disorder. Fetal hemoglobin (HbF) is a major modulator of the disease severity by both decreasing HbS intracellular concentration and inhibiting its polymerization. However, heterocellular distribution of HbF is common in SCD. For HbS polymerization inhibition, the hypothesis of an "HbF per red blood cell (HbF/RBC) threshold" requires accurate measurement of HbF in individual RBC. To date, HbF detection methods are limited to a qualitative measurement of RBC populations containing HbF - the F cells, which are variable. We developed an accurate method for HbF quantification in individual RBC. A linear association between mean HbF content and mean RBC fluorescence by flow cytometry, using an anti-Human-HbF antibody, was obtained from non-SCD subjects presenting homogeneous HbF distribution. This correlation was then used to measure HbF/RBC. Hydroxyurea (HU) improves SCD clinical manifestations, mainly through its ability to induce HbF synthesis. HbF distribution was analyzed in 14 SCD patients before and during HU treatment. A significant decrease in RBC population containing less than 2 pg of HbF/RBC was observed. Therefore, we tested associations for %RBC above different HbF/RBC thresholds and showed a decrease in the pathognomonic vaso-occlusive crisis incidence from the threshold of 4 pg. This quantity was also correlated with the level of sickle RBC after in vitro deoxygenation. This new method allows the comparison of HbF/RBC distributions and could be a useful tool to characterize baseline patients HbF distribution and therapeutic response to HbF inducers. This article is protected by copyright. All rights reserved.

This article is protected by copyright. All rights reserved.