ゲル内SODアッセイにより、SOD-2が線虫の中で唯一活性のある水溶性SOD酵素であることが明らかになった

In-gel SOD assay reveals SOD-2 is the single active, water-soluble SOD enzyme in .

抄録

線虫は5つの遺伝子を持ち、好気性生物の中では最大である。以前の研究で、5つの遺伝子のそれぞれが異種発現系で完全に活性なSODタンパク質を作ることができることが明らかになった。しかし、これらの遺伝子の全欠失は、これらの動物が外部から加えられた酸化ストレス条件に対してより敏感であるように見える以外は、生存に何の影響も与えない。我々は、ゲル内SOD活性解析と、Cu-ZnSOD酵素に対する選択的阻害剤としてのKCNを用いて、5つの遺伝子のうちいくつが実際に活性のあるSOD酵素を作っているのかを調べた。ここでは、5種類のSODタンパク質のうち、ミトコンドリアSODだけが、抽出液の水溶性画分中で活性を持つという証拠を示す。膜結合型SODである可能性のあるSod-4aアイソフォームの活性を調べる機会はなかった。変異体分析により、2つのミトコンドリアSODタンパク質のうち、SOD-2が.N.A.の唯一の天然活性型SODであることがさらに確認された。

The nematode has a contingent of five genes, one of the largest among aerobic organisms. Earlier studies revealed each of the five genes is capable of making perfectly active SOD proteins in heterologous expression systems therefore none appears to be a pseudogene. Yet deletion of the entire contingent of genes fails to impose any effect on the survival of except these animals appear more sensitive to extraneously applied oxidative stress conditions. We asked how many of the five genes are actually making active SOD enzymes in through the usage of in-gel SOD activity analysis and by using KCN as a selective inhibitor against Cu-ZnSOD enzyme(s). Here we provide evidence that out of the five SOD proteins only the mitochondrial SOD is active in the water-soluble fraction of extracts albeit at an apparently much lower activity than the multiple active SODs in and . We had no opportunity to test the activity of Sod-4a isoform which is possibly a membrane-bound form of SOD. The mutant analysis further confirmed that among the two mitochondrial SOD proteins, SOD-2 is the only naturally active SOD in .