口腔白板症のサーベイランスツールとしてテロメア長測定を活用するための独立したアプローチ

A standalone approach to utilize telomere length measurement as a surveillance tool in oral leukoplakia.

抄録

口腔扁平上皮癌（OSCC）は、多くの場合、口腔扁平上皮症（OL）と呼ばれる口腔内の任意の表面に白い斑点が先行する。分裂中の上皮細胞のテロメア長（TL）の短縮が促進されると発癌性変化を引き起こす可能性があるため、テロメア長測定はOLの予測バイオマーカーとして役立つ可能性がある。しかし、ばらつきが大きく、普遍的な基準がないため、その応用は限られている。ここでは、対になった末梢血単核細胞（PBMC）を内部参照としてTLを評価する方法を説明し、その翻訳上の妥当性を示します。男性OL患者50名と男性健常対照者（HC）44名から、口腔ブラシ生検とペアの静脈血を採取した。相対的なTLはqPCRで測定した。OLまたは健常者の各サンプルのTLを、ペアのPBMCサンプルで正規化した（TL比）。OL患者では、リスクの高い口腔習慣を持たない健常対照者と比較して、パッチ部だけでなく遠位部の正常口腔組織でも平均TL比が有意に短かった。パッチ部のTL比は正常だが、対になる正常遠位部のTL比が有意に短かったサブグループでは、形成不全が多く見られた。これらのデータは、ペアのPBMCサンプルを用いてTL減少を評価することで、外部の参照DNAを必要とせず、データを普遍的に比較することができ、フォローアッププログラムのために高リスクのOLグループを定義するための有用なマーカーとなることを示唆している。さらに大規模な研究では、このアプローチを検証し、他の前悪性疾患にも広く応用できると考えられる。

Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is often preceded by a white patch on any surface of the mouth, called oral leukoplakia (OL). As accelerated telomere length (TL) shortening in dividing epithelial cells may lead to oncogenic transformation, telomere length measurement could serve as a predictive biomarker in OL. However, due to high variability and lack of a universal reference, there has been a limited translational application. Here, we describe an approach of evaluating TL using paired peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) as an internal reference and demonstrate its translational relevance. Oral brush biopsy and paired venous blood were collected from 50 male OL patients and 44 male healthy controls (HC). Relative TL was measured by qPCR. TL of each OL or healthy sample was normalized to the paired PBMC sample (TL ratio). In OL patients, the mean TL ratio was not only significantly shorter in the patch but also in distal normal oral tissue, relative to healthy controls without a high-risk oral habit. Dysplasia was frequently associated with a subgroup that showed a normal TL ratio at the patch but significantly shorter TL ratio at a paired normal distal site. Our data suggest that evaluation of TL attrition using a paired PBMC sample eliminates the requirement of external reference DNA, makes data universally comparable and provides a useful marker to define high-risk OL groups for follow-up programs. Larger studies will further validate the approach and its broader application in other pre-malignant conditions.