舌下錠および口腔スプレー投与後の唾液中ビタミンBのHPLC定量における極性布袋抽出の適用性を検討する

Investigating the applicability of polar fabric phase sorptive extraction for the HPLC quantitation of salivary vitamin B following administration of sublingual tablets and oral sprays.

抄録

本研究では、唾液中ビタミンB濃度のモニタリングのために、高速液体クロマトグラフィー-紫外線検出（HPLC-UV）と組み合わせたシンプルで迅速なファブリックフェーズソルプティブ抽出（FPSE）プロトコルを開発しました。さまざまなゾルゲルコーティングのセルロース膜とポリエステル膜を評価し、唾液サンプルから標的分析物を選択的に抽出するために、ゾルゲルCarbowax 20Mコーティングのポリエステル膜を選択しました。試料量、抽出時間、攪拌速度の最適化には、面心中心複合計画（FC-CCD）を用い、その他の実験因子は古典的な一要因一時間法（OFAT）を用いて検討した。FPSE-HPLC-UV法のバリデーションは、バイオ分析法に関するFDAガイドラインに従って行われました。ビタミンBの定量下限は0.10μgmL、リニアレンジは0.10-10.0μgmLであった。日中および日中の相対回収率はそれぞれ87.5-113.8%および88.2-119.2%であった。相対標準偏差はすべてのケースで8.2%より良好であり、良好なメソッド精度が実証された。ゾルゲルCarbowax 20MでコーティングしたFPSE膜は、最大25回まで再利用可能であることがわかった。最後に、提案されたスキームは、舌下錠と口腔スプレーの投与後の異なる時点における唾液中のビタミンBの定量に成功しました。

In this study, a simple and rapid fabric phase sorptive extraction (FPSE) protocol combined with high performance liquid chromatography-ultraviolet detection (HPLC-UV) was developed for the monitoring of salivary vitamin B levels. Different sol-gel coated cellulose and polyester membranes were evaluated and sol-gel Carbowax 20 M coated polyester membranes were chosen for the selective extraction of the target analyte from saliva samples. Face-centered central composite design (FC-CCD) was employed for the investigation and optimization of sample volume, extraction time and stirring rate, while the other experimental factors were investigated using the classical one-factor-at-a- time" (OFAT) method. Validation of the FPSE-HPLC-UV method was conducted according to the FDA guidelines for bioanalytical methodologies. The lower limit of quantification for vitamin B was 0.10 μg mL and the linear range was 0.10-10.0 μg mL. The relative recoveries for intra-day and inter-day studies were 87.5-113.8% and 88.2-119.2%, respectively. The relative standard deviation was better than 8.2% in all cases, demonstrating good method precision. The sol-gel Carbowax 20 M coated FPSE membranes were found to be reusable for up to 25 times. Finally, the proposed scheme was successfully employed for the quantitation of salivary vitamin B at different time points following the administration of sublingual tablets and oral sprays.