口腔扁平上皮癌におけるPTEN発現とメチル化の状態

PTEN expression and methylation status in oral squamous cell carcinoma.

• Yoshinori Kurasawa
• Masashi Shiiba
• Megumi Nakamura
• Kazuaki Fushimi
• Takashi Ishigami
• Hiroki Bukawa
• Hidetaka Yokoe
• Katsuhiro Uzawa
• Hideki Tanzawa

抄録

PTENは、染色体10q23.3に位置する腫瘍抑制遺伝子である。PTENのダウンレギュレーションは、遺伝子変異や欠失に加えて、様々な悪性腫瘍においても認められている。しかし、口腔癌におけるPTEN遺伝子のプロファイルについてはほとんど知られていない。本研究では、口腔扁平上皮癌（OSCC）113例とOSCC由来細胞株9株を対象に、PTENの発現プロファイルと遺伝子変化を調べた。免疫組織化学的解析の結果、正常組織とがん領域ではPTENタンパク質の免疫組織化学的スコアに統計学的に有意な差が認められた（P=0.0104）ことから、OSCCではPTENタンパク質の発現が低下していることが示唆された。PTENタンパク質発現のダウンレギュレーションと腫瘍の臨床病理学的特徴との間には有意な相関は認められなかった。逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（RT-PCR）解析の結果、OSCC由来の9つの細胞株では、正常口腔上皮細胞と比較してPTEN mRNAの発現が低下していた。しかし、脱メチル化試薬で処理することにより、4つの細胞株でPTEN mRNAの発現が回復した。これらの細胞株では、ポリメラーゼ連鎖反応-一本鎖コンフォメーション多型（PCR-SSCP）解析でも遺伝子変異は検出されなかった。これらの結果から、エピジェネティックな変化が PTEN 発現のダウンレギュレーションに関係している可能性が示唆された。このことから、PTENはOSCCの腫瘍形成に重要な分子であることが示唆された。

PTEN is a tumor suppressor gene located on chromosome10q23.3. In addition to genetic mutations and deletions, the down-regulation of PTEN has been found in various malignant tumors. However, little is known about the profile of PTEN gene in oral carcinomas. In this study, the expression profiles and genetic alterations of PTEN were examined in 113 oral squamous cell carcinoma (OSCC) cases and 9 OSCC-derived cell lines. An immunohistochemical analysis showed statistically significant differences in the immunohistochemical (IHC) scores for PTEN protein in normal tissues and in cancerous regions (P=0.0104), suggesting that PTEN protein expression is down-regulated in OSCC. No significant correlations existed between the down-regulation of PTEN protein expression and the clinicopathological features of the tumor. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis showed a lower PTEN mRNA expression in the 9 OSCC-derived cell lines examined, as compared to the normal oral epithelium cells. However, treatment with a demethylating reagent restored PTEN mRNA expression in 4 cell lines. No genetic mutations were detected in these cell lines by polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism (PCR-SSCP) analysis. The results suggest that epigenetic changes may be related to the down-regulation of PTEN expression. We therefore conclude that PTEN is a crucial molecule in the tumorigenesis of OSCC.