ミネラル三酸化物凝集体ベースの歯内療法用シーラーは、ヒト骨芽細胞様細胞培養においてハイドロキシアパタイト核生成を刺激する

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J Endod.2012 Jul;38(7):971-6. S0099-2399(12)00212-9. doi: 10.1016/j.joen.2012.02.018.Epub 2012-04-06.

ミネラル三酸化物凝集体ベースの歯内療法用シーラーは、ヒト骨芽細胞様細胞培養においてハイドロキシアパタイト核生成を刺激する

Mineral trioxide aggregate-based endodontic sealer stimulates hydroxyapatite nucleation in human osteoblast-like cell culture.

Loise Pedrosa Salles
Ana Lívia Gomes-Cornélio
Felipe Coutinho Guimarães
Bruno Schneider Herrera
Sonia Nair Bao
Carlos Rossa-Junior
Juliane Maria Guerreiro-Tanomaru
Mario Tanomaru-Filho

PMID: 22703663 DOI: 10.1016/j.joen.2012.02.018.

抄録

はじめに:

本研究の主な目的は、新しいミネラル三酸化物凝集体（MTA）ベースの歯内療法用シーラーであるMTA Fillapex（MTA-F; Angelus, Londrina, Brazil）の生体適合性と生物活性をヒト細胞培養で評価することであった。

INTRODUCTION: The main purpose of this study was to evaluate the biocompatibility and bioactivity of a new mineral trioxide aggregate (MTA)-based endodontic sealer, MTA Fillapex (MTA-F; Angelus, Londrina, Brazil), in human cell culture.

方法:

ヒト骨芽細胞様細胞（Saos-2）を、MTA-F、Epiphany SE（EP-SE; SybronEndo、Orange、CA）、およびジンクオキシド-オイゲノールシーラー（ZOE）に1、2、3、および7日間曝露した。未暴露の培養物を対照群（ＣＴ）とした。細胞の生存性はMTTアッセイで評価し、形態は走査型電子顕微鏡(SEM)で評価した。MTA-Fの生理活性は、アルカリホスファターゼ活性(ALP)とアリザリンレッド染色(ARS)による培養物中のカルシウム沈着物の検出により評価した。エネルギー分散型X線分光法(EDS)を用いて、ヒドロキシアパタイト結晶(HAP)の化学的特性を評価した。Saos-2細胞を、ARSおよびSEM/EDSのために21日間培養した。ＡＲＳの結果は、面積当たりの染色された結節の数として表された。統計分析は、分散分析およびボンフェローニ検定を用いて行った（P < 0.01）。

METHODS: Human osteoblast-like cells (Saos-2) were exposed for 1, 2, 3, and 7 days to MTA-F, Epiphany SE (EP-SE; SybronEndo, Orange, CA), and zinc oxide-eugenol sealer (ZOE). Unexposed cultures were the control group (CT). The viability of the cells was assessed by MTT assay and the morphology by scanning electron microscopy (SEM). The bioactivity of MTA-F was evaluated by alkaline phosphatase activity (ALP) and the detection of calcium deposits in the culture with alizarin red stain (ARS). Energy-dispersive X-ray spectroscopy (EDS) was used to chemically characterize the hydroxyapatite crystallites (HAP). Saos-2 cells were cultured for 21 days for ARS and SEM/EDS. ARS results were expressed as the number of stained nodules per area. Statistical analysis was performed with analysis of variance and Bonferroni tests (P < .01).

結果:

MTA-Fに1日、2日、3日曝露すると細胞毒性が増加した。対照的に、MTA-Fへの曝露7日後には生存率が上昇した。EP-SEおよびZOEへの曝露は、すべての時点で細胞毒性を示した。7日目において、ALP活性の増加はMTA-F群で有意であった。MTA-F群では、ARS染色された結節の割合が最も高かった（MTA-F＞CT＞EP-SE＞ZOE）。SEM/EDS分析では、MTA-F群とCT群にのみハイドロキシアパタイト結晶が認められた。MTA-F群では、結晶の形態や化学組成がCT群とは異なっていた。

RESULTS: MTA-F exposure for 1, 2, and 3 days resulted in increased cytotoxicity. In contrast, viability increased after 7 days of exposure to MTA-F. Exposure to EP-SE and ZOE was cytotoxic at all time points. At day 7, ALP activity increase was significant in the MTA-F group. MTA-F presented the highest percentage of ARS-stained nodules (MTA-F > CT > EP-SE > ZOE). SEM/EDS analysis showed hydroxyapatite crystals only in the MTA-F and CT groups. In the MTA-F group, crystallite morphology and chemical composition were different from CT.

結論:

硬化後、MTA-Fの細胞毒性が低下し、HAP結晶の核生成を促進するのに適した生理活性を示します。

CONCLUSIONS: After setting, the cytotoxicity of MTA-F decreases and the sealer presents suitable bioactivity to stimulate HAP crystal nucleation.