BRP-187。5-リポキシゲナーゼ/5-リポキシゲナーゼ活性化蛋白質（FLAP）複合体を阻害することにより作用する、ロイコトリエン生合成の強力な阻害剤です

BRP-187: A potent inhibitor of leukotriene biosynthesis that acts through impeding the dynamic 5-lipoxygenase/5-lipoxygenase-activating protein (FLAP) complex assembly.

• Ulrike Garscha
• Susanna Voelker
• Simona Pace
• Jana Gerstmeier
• Besa Emini
• Stefanie Liening
• Antonietta Rossi
• Christina Weinigel
• Silke Rummler
• Ulrich S Schubert
• Gerhard K E Scriba
• Erşan Çelikoğlu
• Burcu Çalışkan
• Erden Banoglu
• Lidia Sautebin
• Oliver Werz

抄録

活性化された白血球でアラキドン酸（AA）からプロ炎症性ロイコトリエン（LT）が生成され、5-リポキシゲナーゼ（5-LO）が核内包に移動し、核膜タンパク質である5-LO-activating protein（FLAP）と機能的な複合体を形成します。FLAPはMAPEGファミリーの一員であり、効率的な変換のために5-LOへのAAの移行を促進し、LTの生合成はFLAPに決定的に依存しています。ここでは、新規LT生合成阻害剤BRP-187が、5-LO核再分布を阻害することなく、ヒト白血球の核内包膜における5-LO/FLAP相互作用を阻害することを示した。BRP-187は、リポ多糖とN-ホルミルメチオニル-ロイシン-フェニルアラニン（IC=7-10nM）で刺激されたヒト単球および多形核白血球において、またイオノフォアA23187（IC=10-60nM）で活性化されたヒト単球および多形核白血球において、5-LO生成物の生成を阻害した。外因性AAの過剰摂取はBRP-187の活性を著しく低下させた。無細胞アッセイにおける5-LOの直接的な阻害は、35倍以上の高濃度でのみ明らかになったが、これは可逆的であり、還元条件下では改善されなかった。BRP-187は、白血球におけるA23187誘発の5-LO/FLAP複合体の形成を阻害したが、5-LOの核内転座は阻害できなかった。また、BRP-187は、AA放出、シクロオキシゲナーゼおよび関連するLOには影響を与えなかったが、もう一つのMAPEGメンバーであるミクロソームプロスタグランジンE合成酵素-1（IC=0.2μM）も強力に阻害した。BRP-187（10mg/kg）は、ジモサン誘発性のマウス腹膜炎において、腹膜滲出液中のLT値を抑制し、血管透過性や好中球浸潤を抑制する効果を示した。以上の結果から、BRP-187はin vitroおよびin vivoでLTの生合成を強力に阻害することが示唆され、これは5-LO/FLAP複合体の形成を阻害することに起因していると考えられ、前臨床試験での評価が必要である。

The pro-inflammatory leukotrienes (LTs) are formed from arachidonic acid (AA) in activated leukocytes, where 5-lipoxygenase (5-LO) translocates to the nuclear envelope to assemble a functional complex with the integral nuclear membrane protein 5-LO-activating protein (FLAP). FLAP, a MAPEG family member, facilitates AA transfer to 5-LO for efficient conversion, and LT biosynthesis critically depends on FLAP. Here we show that the novel LT biosynthesis inhibitor BRP-187 prevents the 5-LO/FLAP interaction at the nuclear envelope of human leukocytes without blocking 5-LO nuclear redistribution. BRP-187 inhibited 5-LO product formation in human monocytes and polymorphonuclear leukocytes stimulated by lipopolysaccharide plus N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine (IC=7-10nM), and upon activation by ionophore A23187 (IC=10-60nM). Excess of exogenous AA markedly impaired the potency of BRP-187. Direct 5-LO inhibition in cell-free assays was evident only at >35-fold higher concentrations, which was reversible and not improved under reducing conditions. BRP-187 prevented A23187-induced 5-LO/FLAP complex assembly in leukocytes but failed to block 5-LO nuclear translocation, features that were shared with the FLAP inhibitor MK886. Whereas AA release, cyclooxygenases and related LOs were unaffected, BRP-187 also potently inhibited microsomal prostaglandin E synthase-1 (IC=0.2μM), another MAPEG member. In vivo, BRP-187 (10mg/kg) exhibited significant effectiveness in zymosan-induced murine peritonitis, suppressing LT levels in peritoneal exudates as well as vascular permeability and neutrophil infiltration. Together, BRP-187 potently inhibits LT biosynthesis in vitro and in vivo, which seemingly is caused by preventing the 5-LO/FLAP complex assembly and warrants further preclinical evaluation.

Copyright © 2016 Elsevier Inc. All rights reserved.