新規に合成された新規ルテニウム(II)の抗血小板活性。Akt/JNKシグナル伝達の可能性

Antiplatelet Activity of a Newly Synthesized Novel Ruthenium (II): A Potential Role for Akt/JNK Signaling.

• Themmila Khamrang
• Kuo-Chen Hung
• Chih-Hsuan Hsia
• Cheng-Ying Hsieh
• Marappan Velusamy
• Thanasekaran Jayakumar
• Joen-Rong Sheu

抄録

がん治療において、ルテニウム錯体は白金化合物の代替物質として考えられており、高い有効性と副作用の少ない有望な抗がん剤であることが証明されています。血小板の活性化は、がんの転移や進行に大きな役割を果たしています。そこで本研究では、新たに合成したルテニウム錯体[Ru(η⁶-cymene)(L)Cl]BF₄(TQ5)(L=4-フェニル-2-ピリジン-2-イル-キナゾリン)のヒト血小板活性化への効果を検討した。ＴＱ５（３〜５μＭ）は、洗浄したヒト血小板において、濃度依存的にコラーゲン誘導血小板凝集を阻害した。しかし、この化合物は、トロンビンおよび9,11-ジデオキシ-11α，9α-エポキシメタノプロスタグランジン（U46619）誘発刺激に対して、それぞれ最大濃度500および100μMでのみ血小板凝集を阻害した。TQ5は、細胞毒性を誘導することなく、コラーゲン誘導性ATP放出およびカルシウム動員（[Ca]）を抑制した。また，アデニル酸シクラーゼ阻害剤であるSQ22536，グアニル酸シクラーゼ阻害剤である1H-[1,2,4]オキサジアゾロ[4,3-a]キノキサリン-1-オン（ODQ）のいずれも，TQ5を介した血小板凝集抑制作用を有意に逆転させなかった。TQ5は、プロテインキナーゼB（Akt）およびc-Jun N末端キナーゼ（JNK）のコラーゲン誘導性リン酸化を阻害したが、ヒト血小板における細胞外シグナル調節キナーゼ1/2（ERK1/2）およびp38-ミトゲン活性化プロテインキナーゼ（p38-MAPK）を効果的に阻害しなかった。さらに、TQ5は全血中の閉塞時間を有意に延長し、マウスにおける血栓性血小板プラグ形成の閉塞時間を増加させた。本研究は、新たに合成されたルテニウム錯体であるTQ5が、ATP放出と[Ca]を阻害し、Akt/JNKシグナルの活性化を低下させることで、強力な抗血小板活性を示すことを初めて示した。以上の結果から、TQ5は、従来から知られている抗血栓薬アスピリンよりも強力な抗血小板作用を示すことから、血栓塞栓症の予防・治療薬として開発できる可能性が示唆されました。

In oncotherapy, ruthenium complexes are considered as potential alternatives for platinum compounds, and have been proved as promising anticancer drugs with high efficacy and lesser side effects. Platelet activation plays a major role in cancer metastasis and progression. Hence, this study explored the effect of a newly synthesized ruthenium complex, [Ru(η⁶-cymene)(L)Cl]BF₄(TQ5), where L = 4-phenyl-2-pyridin-2-yl-quinazoline), on human platelet activation. TQ5 (3-5 µM) inhibited concentration-dependent collagen-induced platelet aggregation in washed human platelets. However, this compound only inhibited platelet aggregation at a maximum concentration of 500 and 100 µM against thrombin and 9,11-dideoxy-11α, 9α-epoxymethanoprostaglandin (U46619)-induced stimulation, respectively. TQ5 inhibited collagen-induced ATP release and calcium mobilization ([Ca]), without inducing cell cytotoxicity. In addition, neither SQ22536, an adenylate cyclase inhibitor, nor 1H-[1,2,4] oxadiazolo [4,3-a]quinoxalin-1-one (ODQ), a guanylate cyclase inhibitor, significantly reversed the TQ5-mediated inhibition of platelet aggregation. TQ5 inhibited the collagen-induced phosphorylation of protein kinase B (Akt) and c-Jun N-terminal kinase (JNK), but did not effectively inhibit extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2) and p38-mitogen-activated protein kinase (p38-MAPK) in human platelets. Additionally, TQ5 significantly prolonged the closure time in whole blood and increased the occlusion time of thrombotic platelet plug formation in mice. This study demonstrates, for the first time, that a newly synthesized ruthenium complex, TQ5, exhibits potent antiplatelet activity by hindering ATP release and [Ca], and by decreasing the activation of Akt/JNK signals. Together, these results suggest that TQ5 could be developed as a therapeutic agent that helps prevent or treat thromboembolic disorders, since it is found to be potently more effective than a well-established antithrombotic aspirin.