高強度レーザー、光線力学療法、クエン酸で処理した歯根によるヒト歯肉線維芽細胞の生存率および増殖の活性化

Stimulation of human gingival fibroblasts viability and growth by roots treated with high intensity lasers, photodynamic therapy and citric acid.

抄録

目的:

本研究の目的は、レーザー、クエン酸、抗菌フォトダイナミックセラピー（aPDT）による根のバイオモディフィケーションが、ヒト歯肉線維芽細胞（FGH）の生存率と増殖に与える影響を比較することであった。

OBJECTIVE: The aim of this study was to compare the effect of root biomodification by lasers, citric acid and antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) on viability and proliferation of human gingival fibroblasts (FGH).

デザイン:

グループは、コントロール（CC-細胞のみ）と、スケーリングとルートプレーニング（positice control - SC）、Er:YAG（ER-60mJ,10pps,10Hz,10s,2940nm）、Nd:YAG（ND-0.5W,15Hz,10s,1640nm）、抗菌光線力学療法（PDT-InGaAIP,30mW,45J/cm,30s,660nm、Tolidine blue O）、クエン酸＋テトラサイクリン（CA）。処理した根断片による24時間コンディショニング培地で線維芽細胞（第6継代、2×10）を培養した。細胞生存率は、24、48、72、96hにMTT試験により測定した。第二の実験では、FGH細胞（10）を、同じ処理を受けた根の断片で培養した。24, 48, 72時間後にSEM写真で細胞数を数えた。さらに、エネルギー分散型分光法（EDS）により化学元素を分析した。データは、二元配置分散分析（第一実験）、反復測定分散分析（第二実験）、分散分析（EDS実験）、 Tukey's testによって補完された（p<0.05）によって分析された。

DESIGN: Groups were divided in control (CC - only cells), and root fragments treated by: scaling and root planing (positice control - SC), Er:YAG (ER-60mJ,10pps,10Hz,10s,2940nm), Nd:YAG (ND-0.5W,15Hz,10s,1640nm), antimicrobial photodynamic therapy (PDT-InGaAIP,30mW,45J/cm,30s,660nm,toluidine blue O), citric acid plus tetracycline (CA). Fibroblasts (6th passage, 2×10) were cultivated in a 24-h conditioned medium by the treated root fragments. Cell viability was measured by MTT test at 24, 48, 72 and 96h. In a second experiment, FGH cells (10) were cultivated on root fragments which received the same treatments. After 24, 48, 72h the number of cells was counted in SEM pictures. In addition, chemical elements were analyzed by energy dispersive spectroscopy (EDS). Data was analyzed by two-way ANOVA (first experiment), repeated measures ANOVA (second experiment) and ANOVA (EDS experiment) tests complemented by Tukey's test (p<0.05).

結果:

ND、PDTおよびCAは、より高い細胞生存率を促進した（p<0.05）。NDとERは根の表面の細胞数が多かった（p<0.05）。ER群ではカルシウムが、CA群では炭素率が高かった（p＜0.05）。

RESULTS: ND, PDT and CA promoted higher cell viability (p<0.05). ND and ER groups presented higher number of cells on root surfaces (p<0.05). ER group presented higher calcium and CA group a higher carbon percentages (p<0.05).

結論:

スケーリングとルートプレーニングを除くすべての治療が線維芽細胞の生存率を刺激し、Er:YAGとNd:YAGで処理した根面はより多くの細胞数を示した。

CONCLUSIONS: All treatments but scaling and root planing stimulated fibroblast viability while Er:YAG and Nd:YAG treated root surfaces presented higher number of cells.