FSGS再発患者の血漿および血清、ならびに糸球体透過性因子によるポッドサイトTRPCチャネルの変化

Changes in podocyte TRPC channels evoked by plasma and sera from patients with recurrent FSGS and by putative glomerular permeability factors.

• Eun Young Kim
• Hila Roshanravan
• Stuart E Dryer

抄録

局所型およびセグメント型糸球体硬化症（FSGS）の原発型は、ポドサイトの機能不全または喪失を引き起こす循環因子によって引き起こされる。FSGSのまれな遺伝的形態は、中膜細胞およびポッドサイトで発現するCa透過性カチオンチャネルをコードするTRPC6、およびポッドサイトのスリット横隔膜ドメインで発現するTRPC6結合タンパク質であるポドシンをコードするNPHS2の突然変異によって引き起こされる可能性がある。ここでは、不死化したマウスのポッドサイトをFSGS再発患者の血清または血漿に24時間曝露すると、細胞表面のTRPC6の定常状態の豊富さが増加し、それに伴って低浸透圧ストレッチ刺激によって誘発された内因性のTRPC6チャネルを介した電流が増加することが観察された。これらの効果は、可溶性ウロキナーゼ受容体（suPAR）と腫瘍壊死因子（TNF）によって模倣され、ネフローゼ症候群に関与する循環因子である。我々が検査した再発FSGS血漿サンプルのほとんど（すべてではないが）は、数時間の間にポドシンの消失を引き起こした。ポドシンの消失はsuPARへの曝露にも見られたが、TNFへの曝露には見られなかった。しかしながら、ＴＮＦは、ＴＲＰＣ６およびポドシンに対するｓｕＰＡＲの作用を増大させ、ＴＮＦおよびｓｕＰＡＲは、再発したＦＳＧＳ血漿サンプルの１つの完全な作用に必要である。TRPC6の表面アバンダンスに対するFSGS血漿、suPARおよびTNFの作用は、αvβ3-インテグリンシグナル伝達の阻害剤であるシレンギタイドによってブロックされた。これらのデータは、原発性FSGSが複数の循環因子によって媒介される不均一な状態であることを示唆しており、TRPC6とαvβ3-インテグリンが治療標的となる可能性を示唆している。

Primary forms of focal and segmental glomerulosclerosis (FSGS) are driven by circulating factors that cause dysfunction or loss podocytes. Rare genetic forms of FSGS can be caused by mutations in TRPC6, which encodes a Ca-permeable cationic channel expressed in mesangial cells and podocytes; and NPHS2, which encodes podocin, a TRPC6-binding protein expressed in podocyte slit diaphragm domains. Here we observed that exposing immortalized mouse podocytes to serum or plasma from recurrent FSGS patients for 24h increased the steady-state cell-surface abundance of TRPC6, accompanied by an increase in currents through endogenous TRPC6 channels evoked by a hypoosmotic stretch stimulus. These effects were mimicked by the soluble urokinase receptor (suPAR) and by tumor necrosis factor (TNF), circulating factors implicated in nephrotic syndromes. Most but not all of the recurrent FSGS plasma samples that we examined also caused a loss of podocin over a period of several hours. The loss of podocin was also seen following exposure to suPAR but not TNF. However, TNF increased the effects of suPAR on TRPC6 and podocin, and TNF and suPAR are required for the full effects of one of the recurrent FSGS plasma samples. The actions of FSGS plasma, suPAR and TNF on surface abundance of TRPC6 were blocked by cilengitide, an inhibitor of αvβ3-integrin signaling. These data suggest that primary FSGS is a heterogeneous condition mediated by multiple circulating factors, and support TRPC6 and αvβ3-integrin as potential therapeutic targets.

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