β-ナフトフラボンによる肝細胞における外来物質代謝酵素の誘導。活性、タンパク質およびmRNAレベルの時間依存的変化

Induction of xenobiotic-metabolizing enzymes in hepatocytes by beta-naphthoflavone: Time-dependent changes in activities, protein and mRNA levels.

• Kateřina Lněničková
• Lenka Skálová
• Lucie Stuchlíková
• Barbora Szotáková
• Petra Matoušková

抄録

本研究では、ラット肝細胞の一次培養におけるチトクロムP450 1A1/2（CYP1A1/2）、NAD(P)H:キノンオキシドレダクターゼ1（NQO1）及びグルタチオンS-トランスフェラーゼ（GSTA）の活性、タンパク質及びmRNAレベルに対する選択的誘導剤の誘導効果の時間依存性を試験し、評価した。試験した酵素の応答の違いを示すために、共通のアリール炭化水素受容体（AhR）リガンドアゴニストであるβ-ナフトフラボン（BNF）を使用した。BNFによるCYP1A1/2の誘導は、すべての時間間隔およびすべてのレベル（すなわち、mRNA、タンパク質、酵素活性）で検出された。NQO1とGSTAのBNF処理に対する応答の違いが観察された。この結果は、異なる異種代謝酵素の誘導剤に対する応答が時間的に変化し、測定されたパラメータに依存していることを示している。これらの理由から、1 回の間隔での治療や 1 回のパラメータ試験のみを特徴とする誘導試験では、誤解を招くような情報が得られる可能性がある。

In the present study, time-dependency of the induction effect of a selective inducer on the activity, protein and mRNA levels of cytochromes P450 1A1/2 (CYP1A1/2), NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1 (NQO1) and glutathione S-transferases (GSTA), in primary culture of rat hepatocytes was tested and evaluated. To show the differences in responses of tested enzymes, the common aryl hydrocarbon receptor (AhR) ligand agonist, beta-naphthoflavone (BNF), was used. Induction of CYP1A1/2 by BNF was detected at all time intervals and at all levels (i.e., mRNA, protein, enzyme activity). Different responses of NQO1 and GSTA upon BNF treatment were observed. Our results demonstrate that the responses of different xenobiotic-metabolizing enzymes to the inducer vary in time and depend on the measured parameter. For these reasons, an induction study featuring only one-time interval treatment and/ or one parameter testing could produce misleading information.