フルオレスカミンを用いたインキャピラリー誘導体化によるアダマンタン系薬剤のUV検出付きキャピラリー電気泳動による迅速測定

In-capillary derivatization with fluorescamine for the rapid determination of adamantane drugs by capillary electrophoresis with UV detection.

• Pornpan Prapatpong
• Nantana Nuchtavorn
• Mirek Macka
• Leena Suntornsuk

抄録

フルオレスカミンを標識試薬として用いるインキャピラリー誘導体化は、アダマンチン系薬剤（メマンチン、アマンタジン、リマンタジン）の分光光度検出による検出性を向上させるために提案された。フルオレスカミンと薬物を10:1の割合でキャピラリー電気泳動装置にゾーンインジェクションで送達した。誘導体化反応は、電圧（20kV）の印加に続いて起こった。誘導体化された生成物、加水分解フルオレスカミンと過剰なフルオレスカミンは、Brij®-35の0.1％w / vおよびアセトニトリルの20％v / vを含む100mMホウ酸緩衝液（pH10.0）を使用して7分で分離した。バリデーションデータは良好な直線性（r>0.98）、精度（%RSDs<3.4）、精度（回収率98.0～102.0%）を示しました。検出限界は6.0～8.5、定量限界は18～25μMの範囲である。バリデーションデータは報告されている方法と同等ですが、現在の方法は感度を向上させ、精度を向上させています（最大6倍）。また、本法の適用により、測定試料中の標識量は100.6～109.3％の範囲内であり、米国薬局方の制限値（90.0～110.0％）に準拠しています。この方法はシンプルで迅速、自動化されており、余分な装置や熟練したオペレーターを必要としませんでした。

In-capillary derivatization using fluorescamine as the labeling reagent was proposed to enhance the detectability of adamantine drugs (memantine, amantadine and rimantadine) by spectrophotometric detection. Fluorescamine and the drugs were delivered to the capillary electrophoresis instrument at a ratio of 10:1 by zone injection. The derivatization reaction occurred following the application of voltage (20 kV). The derivatized products, hydrolyzed- fluorescamine and excess fluorescamine were separated in 7 min using 100 mM borate buffer (pH 10.0) containing 0.1% w/v of Brij®-35 and 20% v/v of acetonitrile. Validation data showed good linearity (r  > 0.98), precision (%RSDs < 3.4), and accuracy (recoveries ranging from 98.0 to 102.0%). The detection and quantitation limits are in the range of 6.0-8.5 and 18-25 μM, respectively. The validation data is comparable to reported methods, however, the current method offers better precision with enhanced sensitivity (up to six times). Applications of the method show percent labeled amounts found in the studied samples within 100.6-109.3%, which complied with the United States Pharmacopeia limit (90.0-110.0%). The method was simple, rapid and, automated, which required no extra instrumentation or skillful operators.

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