GABA受容体とTRPV4チャネルの機能的結合が卵管内でのプロゲステロンシグナル伝達を促進していることを明らかにした

Functional coupling of GABA receptors and the channel TRPV4 mediates rapid progesterone signaling in the oviduct.

• Carole Jung
• Victor Fernández-Dueñas
• Cristina Plata
• Anna Garcia-Elias
• Francisco Ciruela
• José M Fernández-Fernández
• Miguel A Valverde

抄録

プロゲステロン（P4）が卵管に沿って卵子と胚の輸送を調節する分子機構は完全には解明されていない。我々は、マウス卵管におけるP4とγ-アミノ酪酸受容体AおよびB（GABA）のアゴニストに対する迅速な反応を報告している。薬理学的操作、遺伝子切除、および卵管細胞におけるsiRNAを介したノックダウン、ならびにHEK 293T細胞における過剰発現実験により、カチオン性チャネルTRPV4、GABAの異なるサブユニット（α1～α3、β2、β3）、およびGABAのP4誘導応答への参加が確認された。イノシトール三リン酸受容体に近接したTRPV4媒介のCa進入は、P4がGABAに結合し、Gタンパク質共役型GABA受容体のトランザクティベーションを行った後のCa振動を開始し、維持するために必要であった。ネイティブ組織およびHEK 293T細胞の共沈実験およびイメージングにより、P4およびGABA受容体アゴニストに応答してGABAおよびGABA受容体が密接に関連し、Gタンパク質が活性化されることが示され、P4およびGABA作動性アゴニストが協働して繊毛拍動を刺激する分子機構が確認された。

The molecular mechanism by which progesterone (P4) modulates the transport of ova and embryos along the oviduct is not fully resolved. We report a rapid response to P4 and agonists of γ-aminobutyric acid receptors A and B (GABA) in the mouse oviduct that was characterized by oscillatory Ca signals and increased ciliary beat frequency (CBF). Pharmacological manipulation, genetic ablation, and siRNA-mediated knockdown in oviductal cells, as well as overexpression experiments in HEK 293T cells, confirmed the participation of the cationic channel TRPV4, different subunits of GABA (α1 to α3, β2, and β3), and GABA in P4-induced responses. TRPV4-mediated Ca entry in close proximity to the inositol trisphosphate receptor was required to initiate and maintain Ca oscillations after P4 binding to GABA and transactivation of G protein-coupled GABA receptors. Coimmunoprecipitation experiments and imaging of native tissue and HEK 293T cells demonstrated the close association of GABA and GABA receptors and the activation of G proteins in response to P4 and GABA receptor agonists, confirming a molecular mechanism in which P4 and GABAergic agonists cooperatively stimulate cilial beating.

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