凍結保存前と保存後のウシおよび酸化細菌細胞に対するゼアラレノンおよびT-2毒素の生体内での細胞毒性効果の比較

COMPARISON OF THE CYTOTOXIC EFFECTS OF ZEARALENON AND T-2 TOXIN ON THE HORSES AND OXEN GERM CELL IN VITRO BEFORE AND AFTER CRYOPRESERVATION.

• A V Tkachev
• O L Tkacheva

抄録

本論文では、ハリコフでの精子採取と凍結保存技術を用いて、馬と雄牛の精子の培養中と解凍後のゼアラレノンとT-2毒素の細胞毒性効果を研究した結果を紹介する。我々はまず、異なる濃度のゼアレノンとT-2毒素(0.5から0.01mM)の膜安定性に対するin vitroの毒性効果、および凍結融解前後の雄馬と雄牛の精液の定量的および定性的な指標を示した。0.5mMのゼアラレノン添加後1時間のネイティブ精子の生物学的活性は変化せず、解凍後は毒素なしのコントロールと比較して19.4％、0.69球（P＜0.01）減少することが明らかになった。0.5 mMの濃度のT-2毒素は、1時間の培養後のネイティブ精子の活性を0.59球(P < 0.01)減少させ、解凍後の活性を60.28 %または2.14球(P < 0.001)減少させた。0.25mM濃度のゼアラレノンで1時間培養しても、原生精子の活性には影響しなかったが、凍結融解後の活性は12.2%または0.41球低下した(P < 0.05)。また、0.25mMの濃度でT-2毒素を投与した場合、1時間後の精子の活性は0.46球(P < 0.05)減少し、解凍後の精子は1.77球(P < 0.001)で分解された。本研究では、精子のパラメータに有意な減少を与える最も低い濃度は0.01 mMであった。このような用量でのゼアラレノンのネイティブ精子への負の影響はなく、解凍後の精子は、それぞれ0.09ポイントと0.27時間、わずかに活性とperezhivayemostを減少させただけであった。ゼアラレノンとT-2トキシンを0.01mMの同量で同時に添加すると、生物学的なペレザイバエモストの減少とネイティブ精子の絶対指標であるペレザイバエモストの減少がそれぞれ0.36ポイントと0.64時間であった（P < 0.05）。

The article presents the results of the studies of cytotoxic effect of zearalenone and T-2 toxin on sperm of horses and bulls during incubation and after thawing according to the technology of sperm obtaining and cryopreservation in Kharkov. We first have shown in vitro toxic effects of different concentrations of zearalenone and T-2 toxin (from 0.5 to 0.01 mM) on the membrane stability, as well as quantitative and qualitative indicators of semen in stallions and bulls before and after freezing and thawing. It has been found that the biological activity of the native sperm in 1 h after addition of 0.5 mM zearalenone is not changed, and after thawing is reduced by 19.4 %, or 0.69 ball (P < 0.01) compared to control without toxin. T-2 toxin at a concentration of 0.5 mM reduced the activity of the native sperm after an hour of incubation by 0.59 ball (P < 0.01) and decreased it after thawing decreased by 60.28 %, or 2.14 ball (P < 0.001). 1 h of incubation with zearalenone at concentration of 0.25 mM did not affect the activity of the native sperm, but the activity after freeze—thaw deteriorated by 12.2 %, or 0.41 ball (P < 0.05). T-2 toxin at a concentration of 0.25 mM reduced activity of native sperm after 1 h exposure by 0.46 ball (P < 0.05), and after thawing spermatozoa degrade it by 1.77 ball (P < 0.001) compared to control without toxins. In our study, the lowest concentration giving a significant decrease in sperm parameters was 0.01 mM. The negative impact of zearalenone in such a dose on the native sperm was absent, and sperm after thawing only slightly reduced activity and perezhivayemost by 0.09 points and 0.27 hours, respectively. The simultaneous addition of zearalenone and T-2 toxin at the same dose of 0.01 mM resulted in a decrease in biological perezhivayemost and absolute indicator of native sperm perezhivayemost by 0.36 points and 0.64 hours (P < 0.05), respectively.