MicroRNA-31がインターロイキン-34の発現を負に制御している

MicroRNA-31 Negatively Regulates Interleukin-34 Expression In Vitro.

• Miaomiao Li
• Yang Dong
• Zhangming Chen
• Lei Meng
• Xingyun Liu
• Xinhui Zhang
• Huimin Wang
• Weijia Mao
• Jie Zhang
• Zhe Jiang
• Ting Huang
• Jie Hu
• Panquan Luo
• Heinrich Korner
• Songcheng Ying
• Jun Li

抄録

インターロイキン-34（IL-34）は最近発見されたサイトカインで、マクロファージの成熟と分化を促進します。我々は以前、1α,25-ジヒドロキシビタミンD3がSH-SY5Y神経細胞においてIL-34の発現をアップレギュレートすることを発見しました。しかし、マイクロRNAがIL-34の発現を制御しているかどうかは完全には明らかになっていません。オンラインTargetScanとMiRandaソフトウェアを用いて、IL-34 mRNAの3'非翻訳領域（3'UTR）に保存されているmicroRNA-31（miR-31）結合部位が1つしかないことを発見しました。興味深いことに、qPCR を用いて、miR-31 のレベルが異なる細胞株の IL-34 mRNA レベルと負の相関があることを実証しました。miR-31 が IL-34 3'UTR レポータールシフェラーゼ活性に及ぼす影響、および IL-34 mRNA とアルゴヌート RISC 触媒成分 2 (AGO2) の結合に及ぼす影響を調べたところ、miR-31 は IL-34 3'UTR に直接結合し、MGC-803 細胞における IL-34 の転写後発現を制御していることが明らかになった。さらに、miR-31ミミックはIL-34の発現レベルを有意に低下させ、miR-31阻害剤はKYSE-45細胞とHT-29細胞においてIL-34の発現を上昇させた。これらの結果から、miR-31はin vitroでIL-34の3'UTRに直接結合することでIL-34の発現をネガティブに制御していることが明らかになった。

Interleukin-34 (IL-34) is a recently discovered cytokine that promotes tissue macrophage maturation and differentiation. We previously found that 1α,25-Dihydroxyvitamin D3 up-regulated IL-34 expression in SH-SY5Y neural cells. However, whether microRNA regulates IL-34 expression is not completely clear. By using on-line TargetScan and MiRanda software, we found that there was only one conserved microRNA-31 (miR-31) binding site in the 3' untranslated region (3'UTR) of IL-34 mRNA. Intriguingly, using qPCR we demonstrated that miR-31 levels were negatively correlated to IL-34 mRNA levels in different cell lines. By examining the effect of miR-31 on IL-34 3' UTR reporter luciferase activity and on IL-34 mRNA and argonaute RISC catalytic component 2 (AGO2) binding, it was found that miR-31 bound directly to IL-34 3'UTR and regulated the post-transcriptional expression of IL-34 in MGC-803 cells. Moreover, a miR-31 mimic significantly reduced IL-34 expression levels while a miR-31 inhibitor up-regulated IL-34 expression in KYSE-45 and HT-29 cells. Taken together, these results show that miR-31 negatively regulates IL-34 expression by directly binding to the IL-34 3' UTR in vitro.