日本語AIでPubMedを検索
重度喘息馬の免疫グロブリンEプロファイリングのための総合的なタンパク質マイクロアレイの開発
Development of a comprehensive protein microarray for immunoglobulin E profiling in horses with severe asthma.
PMID: 31429513 PMCID: PMC6766494. DOI: 10.1111/jvim.15564.
抄録
背景:
重度の馬喘息（SEA）として知られる馬の重度の喘息は、様々な環境中のエアロアレルゲンに対するアレルゲン特異的免疫グロブリンE（IgE）の増加に関連した、流行性のパフォーマンスを制限する疾患である。
BACKGROUND: Severe asthma in horses, known as severe equine asthma (SEA), is a prevalent, performance-limiting disease associated with increased allergen-specific immunoglobulin E (IgE) against a range of environmental aeroallergens.
目的:
SEAの影響を受けた馬を対象に、実証済みおよび新規の環境タンパク質に対するIgEのプロファイリングを行うためのタンパク質マイクロアレイプラットフォームを開発する。
OBJECTIVE: To develop a protein microarray platform to profile IgE against a range of proven and novel environmental proteins in SEA-affected horses.
動物:
SEAに罹患した6頭と、臨床的に健康な6頭のウォーミングブラッドのパフォーマンス馬。
ANIMALS: Six SEA-affected and 6 clinically healthy Warmblood performance horses.
方法:
馬に関連する花粉、細菌、真菌、節足動物を含む多数のファミリーからのタンパク質抽出物と精製タンパク質を用いたタンパク質マイクロアレイ(n = 384)を開発した。条件は、印刷、インキュベーション、免疫標識、生体液源、濃縮技術、再現性、特異性について最適化され、評価された。
METHODS: Developed a protein microarray (n = 384) using protein extracts and purified proteins from a large number of families including pollen, bacteria, fungi, and arthropods associated with the horses, environment. Conditions were optimized and assessed for printing, incubation, immunolabeling, biological fluid source, concentration techniques, reproducibility, and specificity.
結果:
この方法により、多数の新規アレルゲンが同定され、SEAと花粉感作との関連も同定された。免疫標識法は、市販のマウス抗馬IgE 3H10源の精度を確認した（R = 0.91）。生体液源の評価では、血清と気管支肺胞ラベージ液（BALF）は同じ特異的IgEプロファイルを示した（平均R = 0.75）。アミコン遠心フィルターは、IgE分析のためのBALFを40倍に濃縮するために最も効率的な技術であることがわかった。一晩のインキュベーションは、感度を高めながらも、同じ感作プロファイルを維持した。再現性が実証され（R =0.97）、タンパク質阻害アッセイを用いた特異性も示された。節足動物、真菌、および花粉は、SEAに対して最大の識別性を示した。
RESULTS: This method identified a number of novel allergens, while also identifying an association between SEA and pollen sensitization. Immunolabeling methods confirmed the accuracy of a commercially available mouse anti-horse IgE 3H10 source (R = 0.91). Biological fluid source evaluation indicated that sera and bronchoalveolar lavage fluid (BALF) yielded the same specific IgE profile (average R = 0.75). Amicon centrifugal filters were found to be the most efficient technique for concentrating BALF for IgE analysis at 40-fold. Overnight incubation maintained the same sensitization profile while increasing sensitivity. Reproducibility was demonstrated (R = 0.97), as was specificity using protein inhibition assays. Arthropods, fungi, and pollens showed the greatest discrimination for SEA.
結論と臨床的重要性:
我々は、馬の環境に関連するアレルゲンの大規模なIgEマッピングにタンパク質マイクロアレイを使用できることを確立した。この技術は、SEAの特異的診断、管理、治療のための健全なプラットフォームを提供する。
CONCLUSIONS AND CLINICAL IMPORTANCE: We have established that protein microarrays can be used for large-scale IgE mapping of allergens associated with the environment of horses. This technology provides a sound platform for specific diagnosis, management, and treatment of SEA.
© 2019 The Authors. Journal of Veterinary Internal Medicine published by Wiley Periodicals, Inc. on behalf of the American College of Veterinary Internal Medicine.