CDK7/9阻害剤SNS-032による転写阻害は、がん遺伝子の中毒を抑制し、ぶどう膜黒色腫の肝転移を減少させる

Transcriptional inhibition by CDK7/9 inhibitor SNS-032 abrogates oncogene addiction and reduces liver metastasis in uveal melanoma.

• Jing Zhang
• Shenglan Liu
• Qianyun Ye
• Jingxuan Pan

抄録

背景:

ぶどう膜黒色腫（UM）患者の生命は、肝転移によって大きく脅かされています。ぶどう膜メラノーマにおける肝有機指向性転移の推進因子についてはほとんど知られていません。癌遺伝子の転写活性の亢進は、おそらく腫瘍の側面を牽引していると考えられる。我々は、サイクリン依存性キナーゼ7/9（CDK7/9）阻害剤であるSNS-032を用いて転写を阻害することで、肝細胞のコロニー化、幹細胞化、細胞運動性を司る癌遺伝子を阻害し、肝転移を減少させることが可能であると仮説を立てた。

BACKGROUND: Life of patients with uveal melanoma (UM) is largely threatened by liver metastasis. Little is known about the drivers of liver organotropic metastasis in UM. The elevated activity of transcription of oncogenes is presumably to drive aspects of tumors. We hypothesized that inhibition of transcription by cyclin-dependent kinase 7/9 (CDK7/9) inhibitor SNS-032 diminished liver metastasis by abrogating the putative oncogenes in charge of colonization, stemness, cell motility of UM cells in host liver microenvironment.

方法:

SNS-032が関連する癌遺伝子の発現に及ぼす影響をqRT-PCR及びウエスタンブロット解析により検討した。NOD-SCIDマウス異種移植モデルとNOGマウスモデルを用いて、それぞれ増殖活性、CSCの発現頻度、肝転移の有無を評価した。

METHODS: The effects of SNS-032 on the expression of the relevant oncogenes were examined by qRT-PCR and Western blotting analysis. Proliferative activity, frequency of CSCs and liver metastasis were evaluated by using NOD-SCID mouse xenograft model and NOG mouse model, respectively.

結果:

その結果、UM細胞ではCDK7/9が高発現しており、SNS-032はNOD-SCIDマウスの異種移植UM細胞およびPDX腫瘍の細胞増殖、アポトーシス誘導、増殖抑制を有意に抑制し、幹細胞関連タンパク質Krüの転写阻害を介して癌幹細胞（CSC）の特性を抑制した。ppel-like factor 4 (KLF4)の転写抑制を介して癌幹細胞（CSC）の特性を抑制し、マトリックスメタロプロテアーゼ9 (MMP9)を介してUM細胞の浸潤性フォノタイプを抑制することを示した。また、SNS-032はc-Myc依存性のRhoA遺伝子の転写を抑制し、RhoA GTPase活性とアクチン重合を低下させ、細胞の運動性と肝転移を抑制することが明らかになった。

RESULTS: The results showed that CDK7/9 were highly expressed in UM cells, and SNS-032 significantly suppressed the cellular proliferation, induced apoptosis, and inhibited the outgrowth of xenografted UM cells and PDX tumors in NOD-SCID mice, repressed the cancer stem-like cell (CSC) properties through transcriptional inhibition of stemness-related protein Krüppel-like factor 4 (KLF4), inhibited the invasive phonotypes of UM cells through matrix metalloproteinase 9 (MMP9). Mechanistically, SNS-032 repressed the c-Myc-dependent transcription of RhoA gene, and thereby lowered the RhoA GTPase activity and actin polymerization, and subsequently inhibited cell motility and liver metastasis.

結論:

結論として、我々は UM 細胞に転移性を付与する転写因子（例えば、CSC の場合は KLF4、細胞運動性の場合は c-Myc）を検証した。これらの結果から、SNS-032は有望な治療薬であることが明らかになり、UMの転移性患者を対象とした臨床試験の実施が期待されます。

CONCLUSIONS: In conclusion, we validate a set of transcription factors which confer metastatic traits (e.g., KLF4 for CSCs, c-Myc for cell motility) in UM cells. Our results identify SNS-032 as a promising therapeutic agent, and warrant a clinical trial in patients with metastatic UM.