MicroRNA-544は、E2F転写因子5を抑制することにより、食道扁平上皮癌細胞の増殖を抑制し、シスプラチンに対する感受性を高める

MicroRNA-544 inhibits esophageal squamous cell carcinoma cell proliferation and enhances sensitivity to cisplatin by repressing E2F transcription factor 5.

• Fengrong Sun
• Cuiping Zhang
• Deliang Ma
• Kai Wang

抄録

食道扁平上皮癌（ESCC）は、世界的に最も一般的な悪性腫瘍の一つです。マイクロRNA（miRNA）-544は、複数のタイプの癌でダウンレギュレーションされている重要な癌関連RNAである。しかし、ESCCの進行におけるmiR-544の役割は不明のままである。本研究では，30 組の ESCC と隣接する正常組織，および ESCC 細胞株のパネルを用いて，RT-qPCR を用いて miR-544 の発現レベルを測定した．細胞増殖および細胞アポトーシスは、MTTおよびフローサイトメトリーアッセイにより評価した。ルシフェラーゼレポーターアッセイとウエスタンブロット解析を行い、ESCCの癌遺伝子であるE2F転写因子5（E2F5）がmiR-544の新規標的遺伝子であることを確認した。その結果、ESCCの組織や細胞株ではmiR-544が頻繁にダウンレギュレーションされていることが明らかになった。また、ESCC細胞でmiR-544を過剰発現させると、細胞増殖が低下し、アポトーシスが増加することが明らかになった。このように、E2F5はmiR-544の標的として同定され、その発現は臨床的なESCC組織においてmiR-544の発現と負の相関を示した。さらに重要なことは、miR-544の過剰発現は、抗がん剤であるシスプラチンに対するESCC細胞の感受性を増加させることであった。以上の結果から、miR-544はE2F5を標的とした腫瘍抑制作用を有しており、ESCCの治療標的となる可能性が示唆された。

Esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) is one of the most common malignancies worldwide. MicroRNA (miRNA)-544 is an important cancer-associated RNA that is downregulated in multiple types of cancer. However, the role of miR-544 in ESCC progression remains unknown. In the present study, miR-544 expression level was determined via RT-qPCR in 30 pairs of ESCC and adjacent normal tissues and in a panel of ESCC cell lines. Cell proliferation and cell apoptosis were assessed by MTT and flow cytometry assays. Luciferase reporter assay and western blot analysis were conducted to verify E2F transcription factor 5 (E2F5), an oncogene in ESCC, as a novel target gene of miR-544. The results illustrated that miR-544 is frequently downregulated in ESCC tissues and cell lines. Overexpression of miR-544 in ESCC cells resulted in decreased cell proliferation and increased cell apoptosis. Thus, E2F5 was identified as a target of miR-544, and its expression was negatively correlated with miR-544 expression in clinical ESCC tissues. More importantly, overexpression of miR-544 led to increased sensitivity of ESCC cells to cisplatin, an anticancer drug. Overall, these findings indicate that miR-544 serves as a tumor suppressor by targeting E2F5; thus, miR-544 may be a therapeutic target for the treatment of ESCC.

Copyright: © Sun et al.