また、転写因子 FOXM1 をサイレンシングすることで、ALDH2 の発現を制御することで、肝癌幹細胞の増殖、遊走、浸潤を抑制し、アポトーシスを誘導することが示された

Silencing transcription factor FOXM1 represses proliferation, migration, and invasion while inducing apoptosis of liver cancer stem cells by regulating the expression of ALDH2.

• Lijian Chen
• Meiyun Wu
• Chunyi Ji
• Miaoxian Yuan
• Chaoyang Liu
• Qiang Yin

抄録

目的:

本研究では、アセトアルデヒド脱水素酵素2（ALDH2）の発現を制御することにより、肝癌幹細胞の自己複製・増殖を促進する転写因子FOXM1の役割を明らかにすることを目的としている。

OBJECTIVE: This study is performed to explore the role of transcription factor FOXM1 in promoting the self-renewal and proliferation of liver cancer stem cells (LCSCs) by regulating the expression of acetaldehyde dehydrogenase-2 (ALDH2).

方法:

CD133 CD24 LCSCを選別し、同定した。FOXM1を阻害した後のLCSCの増殖、コロニー形成率、遊走、浸潤、アポトーシスを決定するために一連の実験を行った。また、増殖、上皮間葉転換（EMT）、アポトーシス、幹細胞化に関連する因子をウエスタンブロット分析により検出した。また、ヌードマウスを用いた腫瘍キセノグラフトを用いて、ALDH2 発現を制御することで、FOXM1 の生体内での腫瘍形成における役割を明らかにした。FOXM1がALDH2プロモーター領域を標的とし、それによってALDH2発現に影響を与えるかどうかを決定するために、ルシフェラーゼ活性アッセイを行った。

METHODS: CD133 CD24 LCSCs were sorted and identified. A series of experiments were carried out to determine the proliferation, colony formation rate, migration, invasion, and apoptosis of LCSCs after interfering with FOXM1. Proliferation-, epithelial-mesenchymal transition (EMT)-, apoptosis-, and stemness-related factors were then detected by western blot analysis. Tumor xenograft in nude mice was used to figure out the role of FOXM1 in tumorigenesis in vivo by regulating ALDH2 expression. Luciferase activity assay was conducted to determine whether FOXM1 could target ALDH2 promoter region and thereby affecting ALDH2 expression.

結果:

選別されたCD133 CD24 Huh-7細胞は幹細胞の特徴を有していた。FOXM1はCD133 CD24 Huh-7細胞で高発現していた。FOXM1をサイレンシングすると、LCSCの増殖とコロニー形成を抑制し、増殖細胞核抗原とKi-67タンパク質の発現を低下させ、LCSCのアポトーシスを促進しながら、LCSCの遊走、浸潤、EMTを抑制し、Baxとcleaved-caspase-3の発現を促進し、Bcl-2の発現を抑制した。FOXM1 をサイレンシングすると、ALDH2 の発現が低下し、LCSCs の Nanog, Oct4, Sox2 の発現が抑制された。

RESULTS: The sorted CD133 CD24 Huh-7 cells had the characteristic of stem cells. FOXM1 was highly expressed in CD133 CD24 Huh-7 cells. Silencing FOXM1 inhibited the proliferation and colony formation of LCSCs and decreased the expression of proliferating cell nuclear antigen and Ki-67 protein; inhibited the migration, invasion, and EMT of LCSCs while promoting the apoptosis of LCSCs, as well as promoted the expression of Bax and cleaved-caspase-3, and inhibited the expression of Bcl-2. Silencing FOXM1 inhibited the expression of Nanog, Oct4, and Sox2 in LCSCs by decreasing the expression of ALDH2. in vivo experiment, silencing FOXM1 suppressed tumorigenesis of LCSCs by decreasing the expression of ALDH2.

結論:

本研究では、FOXM1をサイレンシングすることにより、ALDH2の発現を低下させてLCSCの幹細胞化を抑制し、LCSCのアポトーシスを誘導しながら増殖、遊走、浸潤、腫瘍化を抑制することを明らかにした。

CONCLUSION: Our study provides evidence that silencing FOXM1 inhibits stemness of LCSCs by decreasing the expression of ALDH2, and represses the proliferation, migration, invasion, and tumorigenesis while inducing the apoptosis of LCSCs.

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