ピノセンブリンは、N-カドヘリンとGABAB受容体のmRNAレベルを低下させることにより、卵巣がん細胞の増殖・遊走を抑制し、アポトーシスを促進する

Pinocembrin inhibits the proliferation and migration and promotes the apoptosis of ovarian cancer cells through down-regulating the mRNA levels of N-cadherin and GABAB receptor.

• Jun Gao
• Shixin Lin
• Yao Gao
• Xia Zou
• Jun Zhu
• Man Chen
• Hong Wan
• Hong Zhu

抄録

ピノセンブリンの卵巣がんへの影響については、私たちの知る限りでは、これまでに研究されたことがありません。また、GABAB1 および GAB2 遺伝子の発現に及ぼすピノセンブリンの影響については、これまで研究されたことがありませんでした。そこで本研究では、卵巣癌細胞の増殖、カドヘリンおよびGAB受容体の発現に対するピノセンブリンの効果を調べ、ピノセンブリンが上皮性卵巣癌の治療に有用であるかどうかを探ることを目的とした。SKOV3細胞を6つのグループに分けた。コントロール（ブランクコントロール）、DDP（ポジティブコントロールとしてシスプラチン；細胞を15μg/mlのDDPでインキュベートした）、25μM（細胞を25μMのピノセムブリンでインキュベートした）、50μM（細胞を50μMピノセムブリンでインキュベート）、100μM（細胞を100μMピノセムブリンでインキュベート）、および200μM（細胞を200μMピノセムブリンでインキュベート）。CCK8アッセイ、セルスクラッチアッセイ、アネキシンV-FITC/PI染色の結果、ピノセンブリン濃度が100μMに達し、処理時間が48時間に達した場合、ピノセンブリンは細胞の増殖と遊走を抑制し、細胞のアポトーシスを促進し、この効果はピノセンブリン濃度の増加に伴って増強されることがわかった。ウェスタンブロッティングの結果、E-カドヘリン、N-カドヘリン、GABAB1およびGABAB2のタンパク質発現は、ピノセンブリンによって有意な影響を受けないことがわかった。RT-PCRにより、ピノセンブリンはE-カドヘリンのmRNAレベルにも有意な影響を及ぼさないが、N-カドヘリン、GABAB1およびGABAB2のmRNAレベルを低下させることがわかった。結論として、ピノセムブリンは、N-カドヘリンとGABAB受容体のmRNAレベルをダウンレギュレーションすることで、卵巣がん細胞の増殖と遊走を抑制し、アポトーシスを促進することがわかった。

There is no previous study on the effect of pinocembrin on ovarian cancer to the best of our knowledge. Moreover, the effects of pinocembrin on the expression of GABAB1 and GABAB2 genes are not studied before. Therefore, this study aimed to investigate effects of pinocembrin on the growth of ovarian cancer cells and the expression of cadherin and GABAB receptor to explore whether pinocembrin was helpful in the treatment of epithelial ovarian cancer. SKOV3 cells were divided into six groups: Control (blank control), DDP (cisplatin as positive control; cells were incubated with 15 μg/ml DDP), 25 μM (cells were incubated with 25 μM pinocembrin), 50 μM (cells were incubated with 50 μM pinocembrin), 100 μM (cells were incubated with 100 μM pinocembrin), and 200 μM (cells were incubated with 200 μM pinocembrin). CCK8 assay, cell scratch assay and Annexin V-FITC/PI staining found that when pinocembrin concentration reached 100 μM and the treatment time reached 48 h, pinocembrin could inhibit the cell proliferation and migration and promote the cell apoptosis, and this effect was enhanced with the increase of pinocembrin concentration. Western blotting found that the protein expression of E-cadherin, N-cadherin, GABAB1 and GABAB2 was not significantly affected by pinocembrin. RT-PCR found that pinocembrin also had no significant influence on the E-cadherin mRNA level, but it could reduce the mRNA levels of N-cadherin, GABAB1 and GABAB2. In conclusion, pinocembrin inhibited the proliferation and migration and promoted the apoptosis of ovarian cancer cells through down-regulating the mRNA levels of N-cadherin and GABAB receptor.

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