日本語AIでPubMedを検索
転移性乳癌患者における循環腫瘍細胞のアンドロゲン受容体の状態の決定
Determination of the androgen receptor status of circulating tumour cells in metastatic breast cancer patients.
PMID: 31718606 PMCID: PMC6852746. DOI: 10.1186/s12885-019-6323-8.
抄録
背景:
転移性乳癌（MBC）患者における循環腫瘍細胞（CTC）の予後関連性は、いくつかの臨床試験で確認されている。しかし、標的治療を受ける患者を層別化するための血液ベースの予測バイオマーカーはまだ不足している。DETECT 試験では、HER2 陰性 MBC 患者の治療決定における CTC 表現型の有用性を検討しています。このコンセプトに関連して、潜在的な予測バイオマーカーの同定を目的とした多くのトランスレーショナルプロジェクトが行われています。アンドロゲン受容体（AR）は、ホルモン受容体陽性腫瘍の70％以上、トリプルネガティブ腫瘍の45％以上に発現しています。本解析の目的は、免疫蛍光を用いて、アンドロゲン受容体の発現に関するCTCの特徴を明らかにすることであった。
BACKGROUND: The prognostic relevance of circulating tumour cells (CTCs) in metastatic breast cancer (MBC) patients has been confirmed by several clinical trials. However, predictive blood-based biomarkers for stratification of patients for targeted therapy are still lacking. The DETECT studies explore the utility of CTC phenotype for treatment decisions in patients with HER2 negative MBC. Associated with this concept is a plethora of translational projects aiming to identify potential predictive biomarkers. The androgen receptor (AR) is expressed in over 70% of hormone receptor-positive and up-to 45% of triple-negative tumours. Studies has indicated the promising nature of AR as a new therapy target with a clinical benefit rate for anti-AR treatment in MBC patients up to 25% The aim of this analysis was the characterization of CTCs regarding the expression of the AR using immunofluorescence.
方法:
MBC 患者は、DETECT 試験で CTC の HER2 状態をスクリーニングしました。CTC 陽性患者の一部（n=67）では、細胞をサイトスピンスライドに移植する前に、CellSearch® Profile Kit を使用して CTC の免疫磁気濃縮を行いました。ARの免疫蛍光染色の確立は、前立腺癌細胞株LNCaPとDU145をポジティブコントロール、ネガティブコントロールとして用いて行った。DAPI、パンサイトケラチン（CK）およびCD45の染色は、核化した上皮細胞をCTCとして識別し、白血球を除外するために適用された。
METHODS: MBC patients were screened for the HER2-status of CTCs in the DETECT studies. In a subset of CTC-positive patients (n = 67) an additional blood sample was used for immunomagnetic enrichment of CTCs using the CellSearch® Profile Kit prior to transfer of the cells onto cytospin slides. Establishment of immunofluorescence staining for the AR was performed using prostate cancer cell lines LNCaP and DU145 as positive and negative control, respectively. Staining of DAPI, pan-cytokeratin (CK) and CD45 was applied to identify nucleated epithelial cells as CTCs and to exclude leucocytes.
結果:
健康なドナーの血液サンプルに AR 発現が確認されている細胞株を用いて、上記のワークフローに従った AR, CK, CD45 の共染色が確立されています。今回のトランスレーショナルプロジェクトでは、DETECT 試験に参加した 67 名の患者の血液サンプルを分析した。67 人の患者のうち 37 人（56%）で少なくとも 1 つの CTC が検出されました。37 例中 16 例（43%）で AR 陽性 CTC が検出された。25 例中 8 例（32%）で CTC が 1 例以上検出され、AR 陽性および AR 陰性の CTC が観察された。
RESULTS: Co-staining of the AR, CK and CD45 according to the above mentioned workflow has been successfully established using cell lines with known AR expression spiked into the blood samples from healthy donors. For this translational project, samples were analysed from 67 patients participating in the DETECT studies. At least one CTC was detected in 37 out of 67 patients (56%). In 16 of these 37 patients (43%) AR-positive CTCs were detected. In eight out of 25 patients (32%) with more than one CTC, AR-positive and AR-negative CTCs were observed.
結論:
MBC患者のCTCサンプルの43％でARの発現が検出された。CTCにおけるAR発現の予測値は、今後の試験で評価する必要があります。
CONCLUSION: In 43% of the analysed CTC samples from patients with MBC the AR expression has been detected. The predictive value of AR expression in CTCs remains to be evaluated in further trials.