KRas-ERKシグナリングは、JMJD6を介したチロシン39でのH2A.Xリン酸化を制御することで、ぶどう膜黒色腫の発症と維持を促進する

KRas-ERK signalling promotes the onset and maintenance of uveal melanoma through regulating JMJD6-mediated H2A.X phosphorylation at tyrosine 39.

• Yaping Li
• Peng Yu
• Ying Zou
• Wenrui Cai
• Weixuan Sun
• Ning Han

抄録

DNA損傷は腫瘍攻撃時に最初に起こる事象であることから、チロシン39上のヒストンH2A.Xのリン酸化が腫瘍関連因子として作用することは合理的であると考えられる。本研究は、この仮説の信憑性を検証することを目的とした。ぶどう膜メラノーマMP65細胞をKRas変異体の発現のためにトランスフェクションした。H2A.Xのリン酸化とERK1/2を測定し、トランスウェル実験を行い、MP65細胞の発育と遊走に及ぼすH2A.Xの影響を調べた。その結果、H2A.XとERK1/2下流遺伝子との制御関係を測定した。さらに、JMJD6とMDM2がH2A.Xのリン酸化に関与しているかどうかを調べた。Rasの変異はERK1/2シグナル伝達を活性化し、Y39でのH2A.Xリン酸化を抑制した。H2A.Xの抑制は、MP65細胞の増殖、遊走、およびCYR61、IGFBP3、WNT16B、NT5E、GDF15、CARD16を含むERK1/2下流遺伝子の転写の制御に寄与した。Ras-ERK1/2シグナルによるH2A.Xリン酸化の抑制は、MDM2を介したJMJD6分解によるものである可能性がある。本研究では、Ras-ERK1/2 シグナルが Y39 における H2A.X リン酸化を抑制することで、ぶどう膜メラノーマ細胞の発育や遊走が抑制されていることが示唆された。さらに、H2A.Xのリン酸化はJMJD6を介して媒介されている可能性があり、MDM2によって分解される可能性があることが示唆された。

Since DNA damage is a first incident occurred during a tumour attack, it is rational that histone H2A.X phosphorylation on tyrosine 39 (H2A.X) may act as a tumour-relevant factor. This study was aimed to test the authenticity of the hypothesis. Uveal melanoma MP65 cells were transfected for expression of KRas mutated. H2A.X phosphorylation and ERK1/2 was measured, and transwell experiment was performed to examine the consequents of H2A.X on MP65 cells developing and migration. Regulatory relationship between H2A.X and ERK1/2 downstream genes were measured. Moreover, whether JMJD6 and MDM2 are involved in H2A.X phosphorylation was studied. Mutation of Ras activated ERK1/2 signalling and inhibited H2A.X phosphorylation at Y39. Silence of H2A.X contributed to the regulation of MP65 cells growth, migration and transcription of ERK1/2 downstream genes, including CYR61, IGFBP3, WNT16B, NT5E, GDF15 and CARD16. The repressed H2A.X phosphorylation through Ras-ERK1/2 signalling might be through MDM2-mediated JMJD6 degradation. Our study suggested that Ras-ERK1/2 signalling inhibited H2A.X phosphorylation at Y39, which led to the uncontrolled developing and migration of uveal melanoma cells. In addition, H2A.X phosphorylation was mediated possibly through JMJD6 which could be degraded by MDM2.