HLA-DR+メモリーT細胞における遺伝的に無傷なHIVの高レベルは、リザーバー研究に有用であることを示している

High levels of genetically intact HIV in HLA-DR+ memory T cells indicates their value for reservoir studies.

• Bethany A Horsburgh
• Eunok Lee
• Bonnie Hiener
• John-Sebastian Eden
• Timothy E Schlub
• Susanne von Stockenstrom
• Lina Odevall
• Jeffrey M Milush
• Teri Liegler
• Elizabeth Sinclair
• Rebecca Hoh
• Eli A Boritz
• Daniel C Douek
• Remi Fromentin
• Nicolas Chomont
• Steven G Deeks
• Frederick M Hecht
• Sarah Palmer

抄録

目的:

HLA-DR+メモリーCD4 T細胞の長期抗レトロウイルス療法中のHIVリザーバーへの寄与は不明である．この問題を解決するために、HLA-DR-およびHLA-DR+メモリーCD4 T細胞内の遺伝的に無傷なHIV DNAの分布と、抗レトロウイルス療法中のこれらの細胞のRNA転写プロファイルを調べた。

OBJECTIVE: The contribution of HLA-DR+ memory CD4 T cells to the HIV reservoir during prolonged antiretroviral therapy is unclear as these cells are commonly excluded when assessing for replication-competent HIV. To address this issue, we examined the distribution of genetically intact HIV DNA within HLA-DR- and HLA-DR+ memory CD4 T cells and the RNA transcriptional profile of these cells during antiretroviral therapy.

デザイン/方法:

HLA-DR+およびHLA-DR-メモリーCD4 T細胞内のHIV DNAランドスケープを調べるために、全長DNAシークエンシングを用いた。また、HLA-DRの状態とHIV RNA転写との関係を調べるために、RNAの定量化とシークエンシングを行った。

DESIGN/METHODS: Full-length DNA sequencing was used to examine the HIV DNA landscape within HLA-DR+ and HLA-DR- memory CD4 T cells. RNA quantification and sequencing was used to interrogate the relationship between HLA-DR status and HIV RNA transcription.

結果:

HLA-DR+ CD4 T細胞は、遺伝的に無傷のHIVゲノムを高頻度で含み、遺伝的に無傷のウイルス配列の半分以上をリザーバーに寄与していた。すべてのT細胞サブセットにおいて、遺伝的に同一の配列の拡大が確認されたことから、治療中に細胞増殖が遺伝的に無傷で欠陥のあるウイルスDNAを維持していることが示唆された。HLA-DR+およびHLA-DR- T細胞の細胞内HIV RNAレベルは、長末端リピート定量PCR定量法およびp6-RT領域のシングルゲノムRNAシークエンシング法のいずれにおいても、統計学的な差異は認められなかった。

RESULTS: HLA-DR+ CD4 T cells contained a high frequency of genetically intact HIV genomes, contributing over half of the genetically intact viral sequences to the reservoir. Expansions of genetically identical sequences were identified in all T-cell subsets, indicating that cellular proliferation maintains genetically intact and defective viral DNA during therapy. Intracellular HIV RNA levels in HLA-DR+ and HLA-DR- T cells were not statistically different by either long terminal repeat quantitative PCR quantification or single-genome RNA sequencing of the p6-RT region.

結論:

増殖性のHLA-DR+サブセットにおける無傷のウイルスDNA配列の割合が高いことから、これらの細胞は効果的な治療中にHIV感染を維持する上で重要であることが示唆されている。このように、これらの細胞は、効果的な治療中にHIVを標的とした免疫介入に含まれるべきである。

CONCLUSION: The high proportion of intact viral DNA sequences in the proliferative HLA-DR+ subset suggests they are critical in maintaining HIV infection during effective therapy. As such, these cells should be included in any immune intervention targeting HIV during effective therapy.