腫瘍同定のための組織標本の局所二重染色イメージングにおける染色温度の影響

Effect of staining temperature on topical dual stain imaging of tissue specimens for tumor identification.

• Margaret R Folaron
• Rendall R Strawbridge
• Kimberley S Samkoe
• Summer L Gibbs
• Scott C Davis

抄録

乳房温存手術における再切除率の低減を追求する中で、手術中のポジティブマージンを識別するための有望なアプローチとして、デュアルプローブ標本染色技術が浮上してきた。この方法は一般的に、細胞表面受容体などの関心のあるバイオマーカーを標的とした蛍光色素と、標的としていない蛍光色素で組織を染色し、両方の色素をイメージングし、器具の不均一性や非特異的な取り込みを補正するために2つの画像を一緒に使用することを含みます。文献の増加は、このアプローチが効果的に合理的な時間枠で新鮮な総標本の腫瘍と正常組織を識別することができることを示唆している。しかし、すべてのパラメータが完全に評価されていないため、染色プロトコルのロバスト性はまだ調査中である。本論文では、染色温度が診断性能に及ぼす影響を検討した。腫瘍（EGFRを過剰発現している）と正常生鮮検体を室温または37℃で染色し、レシーバー演算子特性（ROC）分析による曲線下面積（AUC）を用いて診断性能を比較した。結果は、我々の経験である量子ドット標識抗体とは対照的に、ライコールIRDye800CW標識抗EGFR抗体とライコールIRdye680RD標識対照抗体をプローブペアとして使用しても、染色温度に大きな影響を受けないことを示唆しています。これらの染色を用いた技術のロバスト性は心強く、染色プロトコルを簡素化します。

In the pursuit of reducing re-excision rates in breast conserving surgery, a dual probe specimen staining technique has emerged as a promising approach to identify positive margins during surgery. This approach generally involves staining the tissue with a fluorescent dye targeted to a biomarker of interest, such as a cell surface receptor, and an untargeted counterpart, imaging both dyes and using the two images together to compensate for instrumentation inhomogeneities and non-specific uptake. A growing body of literature suggests that this approach can effectively discriminate tumor and normal tissue in gross fresh specimens in reasonable timeframes. However, the robustness of the staining protocol is still under investigation as all parameters have not been fully evaluated. In this paper, we examine the effect of staining temperature on diagnostic performance. Tumor (overexpressing EGFR) and normal fresh specimens were stained at room temperature or 37 °C and diagnostic performance compared using area under the curve (AUC) from receiver operator characteristic (ROC) analysis. The results suggest that the use of Licor IRDye800CW-labeled anti-EGFR antibody and Licor IRdye680RD-labeled control antibody as the probe pair is not significantly affected by staining temperature, in contrast to our experience with quantum-dot labeled antibodies. The robustness of the technique using these stains is reassuring and simplifies the staining protocol.