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マウス骨髄腫CH12F3-2細胞におけるインターロイキン-4誘導クラススイッチ組換えの解析
Analysis of Interleukin-4-Induced Class Switch Recombination in Mouse Myeloma CH12F3-2 Cells.
PMID: 31939180 DOI: 10.1007/978-1-0716-0247-8_15.
抄録
Bリンパ球の親和性成熟は、体性超変異とクラススイッチ組換えを含むプロセスである。クラススイッチ組換えは、ヒトの適応免疫の基本的な要因である。このプロセスの摂動は、ヒトの健康に悪影響を及ぼし、全世界的な染色体再配列と細胞の形質転換をもたらす。クラススイッチ組換え効率の評価は、免疫毒性成分の実験室診断の重要な要素である。ここでは、クラススイッチ組換えの効率を試験するための方法について述べる。抗ＣＤ４０抗体、形質転換成長因子β、および組換えインターロイキン-４（ＩＬ-４）を用いたマウス骨髄腫ＣＨ１２Ｆ３-２細胞株の培養は、免疫グロブリンのアイソタイプをＩｇＭからＩｇＡに切り替えることにつながるシグナル伝達ネットワークイベントのカスケードを誘発する。本章では、毒性学的実験室診断における環境汚染物質の影響評価のためのクラススイッチ組換えアッセイの方法論を説明する。
Affinity maturation of B lymphocytes is a process that includes somatic hypermutation and class switch recombination. Class switch recombination is a fundamental factor of the human adaptive immunity. The perturbation of this process has an adverse effect on human health, and results in global chromosome rearrangements and cell transformation. Evaluation of the class switch recombination efficiency is an important component of laboratory diagnosis of immunotoxic components. Here we describe a method for testing the efficiency of the class switch recombination. Cultivation of mouse myeloma CH12F3-2 cell line with anti-CD40 antibodies, transforming growth factor beta, and recombinant interleukin-4 (IL-4) triggers a cascade of signal transduction network events that lead to switching the immunoglobulin isotypes from IgM to IgA. This chapter describes the methodology of class switch recombination assay for assessment of the effect of environmental pollutants in toxicological laboratory diagnostics.