サイト特異的リン酸化は、様々な細胞でキリン3の機能を制御している

Site-specific phosphorylation regulates the functions of kindlin-3 in a variety of cells.

• Katarzyna Bialkowska
• Khalid Sossey-Alaoui
• Elzbieta Pluskota
• Lahoucine Izem
• Jun Qin
• Edward F Plow

抄録

FERM ドメインタンパク質であるキンドリン-3 は、インテグリンβサブユニットに結合することにより、特定の造血細胞および非造血細胞においてインテグリンの活性化に重要な役割を果たしていることが、単離された細胞、マウス、ヒトの研究により明らかにされてきた。このように、インテグリンの活性化には、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化、血小板の活性化の3つの機能があります。血小板、HEL巨核球様細胞、BT549乳癌細胞を活性化すると、免疫蛍光またはウェスタンブロッティングで評価されるように、pSの発現が増強された。血小板では、pSは刺激を受けると急速かつ一過性に上昇した。キンドリン-3の変異体であるTS/AAキンドリン-3をマウス巨核球に導入したところ、インテグリンαβの活性化に失敗したが、野生型キンドリン-3は活性化した。MDA-MB231乳癌細胞において、TS/AAキンドリン-3の発現は、細胞の拡がり、遊走、浸潤、VEGF産生を抑制した。野生型キリン3発現細胞はin vivoで腫瘍の増殖を著しく増加させたが、TS/AAキリン3は腫瘍の進行を有意に抑制した。このように、我々のデータは、キンドリン-3の特異的なリン酸化イベントがその細胞機能を制御していることを証明している。

Studies of isolated cells, mice, and humans have demonstrated the vital role of the FERM domain protein kindlin-3 in integrin activation in certain hematopoietic and non-hematopoietic cells, consequent to binding to integrin β-subunits. To explore regulatory mechanisms, we developed a monoclonal antibody that selectively recognizes the phosphorylated form of Ser (pS) in kindlin-3. Activation of platelets, HEL megakaryocytic-like cells and BT549 breast cancer cells led to enhanced expression of pS as assessed by immunofluorescence or Western blotting. In platelets, pS rose rapidly and transiently upon stimulation. When a mutant form of kindlin-3, TS/AA kindlin-3, was transduced into mouse megakaryocytes, it failed to support activation of integrin αβ, whereas wild-type kindlin-3 did. In MDA-MB231 breast cancer cells, expression of TS/AA kindlin-3 suppressed cell spreading, migration, invasion, and VEGF production. Wild-type kindlin-3 expressing cells markedly increased tumor growth in vivo, whereas TS/AA kindlin-3 significantly blunted tumor progression. Thus, our data establish that a unique phosphorylation event in kindlin-3 regulates its cellular functions.

© 2020 Bialkowska et al.