CDK9はYAPが駆動する肝芽細胞腫の発生には無効である

CDK9 is dispensable for YAP-driven hepatoblastoma development.

• Xinyan Chen
• Andras Kiss
• Zsuzsa Schaff
• Katja Evert
• Yi Zhang
• Sheng Zhong
• Jingxiao Wang
• Matthias Evert
• Diego F Calvisi
• Xin Chen

抄録

背景:

肝芽細胞腫（HB）は小児の肝臓悪性腫瘍の中で最も一般的な疾患であり、主に生後4年以内に発生します。最近の研究では、ヒトHBサンプルにおいて、Wnt/β-カテニンおよびYAP/Hippo（YAPはyes-associated protein）経路が頻繁に協調的に活性化されていることが明らかになりました。さらに、マウス肝臓で活性化されたβ-カテニンとYAPを過剰発現させると、YAP/β-カテニンマウスでのHB形成が誘発されることが明らかになった。サイクリン依存性キナーゼ9（CDK9）は伸長性キナーゼであり、YAP駆動の腫瘍形成を媒介することが示されている。HBの分子病態におけるCDK9の役割については、これまで調査されていない。

BACKGROUND: Hepatoblastoma (HB) is the most common pediatric liver malignancy, occurring mainly during the first 4 years of life. Recent studies unraveled the frequent, coordinated activation of Wnt/β-catenin and YAP/Hippo (where YAP is yes-associated protein) pathways in human HB samples. Furthermore, it was found that concomitant overexpression of activated forms of β-catenin and YAP in the mouse liver triggers HB formation in YAP/β-catenin mice. Cyclin-dependent kinases 9 (CDK9) is an elongating kinase, which has been shown to mediate YAP-driven tumorigenesis. The role of CDK9 in HB molecular pathogenesis has not been investigated to date.

方法:

CDK9の発現は、ヒトHB病変、HB細胞株、およびYAP/β-カテニンマウスの肝臓において決定された。CDK9はヒトHB細胞株でサイレンシングされ、増殖率およびYAP標的に対する影響を解析した。YAPS127Aおよび∆N90-β-カテニンをshCdk9または対照のshLuc（ここでLucはルシフェラーゼ）プラスミドと一緒に流体力学的にトランスフェクションし、Cdk9のインビボでのHB発生のための要件を評価するために採用した。

METHODS: CDK9 expression was determined in human HB lesions, HB cell lines, and YAP/β-catenin mouse livers. CDK9 was silenced in human HB cell lines and the effects on growth rate and YAP targets were analyzed. Hydrodynamic transfection of YAPS127A and ∆N90-β-catenin together with either shCdk9 or control shLuc (where Luc is luciferase) plasmids was employed to assess the requirement of Cdk9 for HB development in vivo.

結果:

CDK9タンパク質の核免疫反応性は、ヒトHBサンプルおよびYAP/β-カテニンマウスHB腫瘍組織において、対応する周囲の非腫瘍性肝組織よりも顕著であった。CDK9タンパク質はヒトHB細胞株でも発現していた。ヒトHB細胞株でCDK9をサイレンシングしても、HB細胞の増殖やYAP標的遺伝子の発現に一貫した効果は得られなかった。驚くべきことに、CDK9のサイレンシングは、YAP/β-カテニンマウスにおける肝腫瘍形成の加速をもたらした。

RESULTS: Nuclear immunoreactivity for CDK9 protein was more pronounced in human HB samples and YAP/β-catenin mouse HB tumor tissues than in corresponding surrounding nontumorous liver tissues. CDK9 protein was also expressed in human HB cell lines. Silencing of CDK9 in human HB cell lines did not lead to consistent effects on HB cell growth or YAP target gene expression. Surprisingly, silencing of Cdk9 led to accelerated liver tumorigenesis in YAP/β-catenin mice.

結論:

CDK9は、HBの発生および進行におけるYAP発がん機能の主要な下流メディエーターではない。

CONCLUSION: CDK9 is not a major downstream mediator of YAP oncogenic function in HB development and progression.

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