飲料および毛髪中のGHBの定量のための分散液-液体マイクロエクストラクションとGC-MS/MSの応用

Application of dispersive liquid-liquid microextraction and GC-MS/MS for the determination of GHB in beverages and hair.

• Liang Meng
• Sihai Chen
• Binling Zhu
• Jun Zhang
• Yue Mei
• Jie Cao
• Kefang Zheng

抄録

最近、γ-アミノ酪酸を含む機能性飲料と表示された「カワ・トレンディードリンク」からγ-ヒドロキシ酪酸（GHB）が検出され、中国の様々なクラブで瞬く間に人気を博した。GHBは強い鎮静作用があり、デートレイプ薬や薬物による性的暴行事件の多幸感剤としてよく使われています。しかし、同じ飲料には天然のGHBが含まれていると考えられている。押収された飲料に含まれるGHBが添加されているのか、それともそれ自体が存在しているのか、事件の性質を複雑に解釈する結果となった。また、血中（5h）や尿中（12h未満）のGHBの検出窓が狭く、GHB曝露の記録が困難である一方、毛髪からの検出時間は数時間から数日/月に延長されている。そこで、飲料や毛髪中のGHBの検出には、分散液体液体マイクロエクストラクション(DLLME)とGC-MS/MSを用いた高感度検出法を確立した。最適抽出条件では、水試料では1.5-500ng/mLの範囲で相関係数(r)0.9986、メラニン試料では0.03-10ng/mgの範囲で相関係数(r)0.9779の範囲で、許容できる線形関係が得られた。LOD（S/N=3）はそれぞれ0.5ng/mLと0.01ng/mgと推定された。スパイクされたサンプルでは70.6～88.5%の回収率が得られた。平均相対誤差（MRE）は±6.5%以内、相対標準誤差（RSD）は4.9%未満であった。DLLMEとGC-MS/MSを組み合わせることで、中国市場で販売されている実際の飲料や中国人の毛髪に含まれるGHBを法医学的な目的で高感度に検出するための代替的な分析手法を提供することができる。提案された方法は、抽出時間が短く、バッチでのサンプルの同時前処理に適しているという利点があった。我々の知る限りでは、DLLMEを用いて飲料と毛髪中のGHBを検出した最初の報告である。

Recently, gamma-hydroxybutyrate (GHB) was determined in "Kawa Trendy Drink" which was labeled as a functional beverage containing gamma-aminobutyric acid and quickly became popular in various club in China. GHB has a strong sedative effect and is often used as a date rape drug and euphoriant in drug-facilitated sexual assaults. However, it is believed that same beverages themselves contain natural GHB. Whether GHB contained in seized beverages was added or exists in themselves resulted in complicated interpretation of the nature of cases. The detection window of GHB in blood (5 h) and urine (<12 h) was narrow, make documentation of GHB exposure difficult, while hair can extend the detection time of GHB from several hours to several days/months. Thus, a sensitive detection method based on dispersive liquid-liquid microextraction (DLLME) and GC-MS/MS for GHB in beverages and hair had been established. Under the optimum extraction conditions, acceptable linear relationship was achieved in the range of 1.5-500 ng/mL with the correlation coefficient (r) of 0.9986 for spiked water samples and in the range of 0.03-10 ng/mg with the correlation coefficient (r) of 0.9979 for spiked melanin samples. The LOD (S/N = 3) was estimated to be 0.5 ng/mL and 0.01 ng/mg, respectively. A recovery of 70.6-88.5% were obtained for spiked samples. The mean relative error (MRE) was within ±6.5% and the relative standard error (RSD) was less than 4.9%. The combination of DLLME with GC-MS/MS offers an alternative analytical approach for the sensitive detection of GHB in real beverages sold in Chinese markets and in hair of Chinese population for forensic purposes. The proposed methods had the advantages of shorter extraction time and were suitable for simultaneous pretreatment of samples in batches. To our knowledge, this is the first report to present GHB in beverages and human hair using DLLME.

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