レクチン経路へのMASP1の追加-ハンセン病関連パズル：遺伝子多型とタンパク質レベルからのヒント

Adding MASP1 to the lectin pathway-Leprosy association puzzle: Hints from gene polymorphisms and protein levels.

• Hellen Weinschutz Mendes
• Angelica Beate Winter Boldt
• Ewalda von Rosen Seeling Stahlke
• Jens Christian Jensenius
• Steffen Thiel
• Iara J Taborda Messias-Reason

抄録

背景:

マイコバクテリウム・レプラエにおける補体因子の沈着は、貪食を促進する可能性がある。このような沈着は、補体のレクチン経路を介して起こる可能性がある。レクチン経路の3つのタンパク質がMASP1遺伝子から産生されている：マンナン結合レクチン関連セリンプロテアーゼ1（MASP-1）、MASP-3、マンナン結合レクチン関連タンパク質44 kDa（MAp44）。これらのタンパク質の重要性は明らかであるにもかかわらず、ハンセン病におけるこれらのタンパク質の役割はこれまで研究されてきませんでした。

BACKGROUND: Deposition of complement factors on Mycobacterium leprae may enhance phagocytosis. Such deposition may occur through the lectin pathway of complement. Three proteins of the lectin pathway are produced from the gene MASP1: Mannan-binding lectin-associated serine protease 1 (MASP-1) and MASP-3 and mannan-binding lectin-associated protein of 44 kDa (MAp44). Despite their obvious importance, the roles played by these proteins have never been investigated in leprosy disease.

方法論:

我々は、マルチプレックス配列特異的PCRにより、5つのMASP1多型をハプロタイプ化した（イントロン性rs7609662*G>Aおよびrs13064994*C>T、エキソン12 3'-翻訳されていないrs72549262*C>、エキソン12 3'-翻訳されていないrs72549262*C>）。G、rs1109452*C>Tおよびrs850314*G>A）を用いて、ハンセン病患者196人（60％、ハンセン病）および対照193人のMASP-1、MASP-3およびMAp44の血清レベルを測定した。

METHODOLOGY: We haplotyped five MASP1 polymorphisms by multiplex sequence-specific PCR (intronic rs7609662*G>A and rs13064994*C>T, exon 12 3'-untranslated rs72549262*C>G, rs1109452*C>T and rs850314*G>A) and measured MASP-1, MASP-3 and MAp44 serum levels in 196 leprosy patients (60%, lepromatous) and 193 controls.

主な発見:

MASP-3とMAp44のレベルは、対照群と比較して患者では低く（それぞれP = 0.0002、P<0.0001）、ハンセン病患者では非ハンセン病患者と比較して低く（それぞれP = 0.008、P = 0.002）、ハンセン病患者では低く（それぞれP = 0.008、P = 0.002）観察された。より高いMASP-3レベルは、ハンセン病抵抗性に関連するバリアント／ハプロタイプを有する対照群に存在した（GT_CCG内のrs13064994*T、rs1109452_rs850314*CG、およびrs850314*A：OR = 0.5-0.6、Pcorr = 0.01-0.04）。感受性ハプロタイプ（GT_GTG/GT_CTG：OR = 2.0、Pcorr = 0.03）に含まれるrs1109452*Tを持つコントロールは、MASP-1レベルが高く、MASP-3レベルが低かった（P≤0.009）。GC_CCGを有する患者では、感受性が高く（OR = 1.7、Pcorr = 0.006）、MAp44レベルが高かった（P = 0.015）。MASP-3の発現は、エクソン12のCpGメチル化および/またはmiR-2861/miR-3181 mRNA結合に依存している可能性があり、RS1109452_RS850314*CAまたはCGを有するコントロールと比較して患者で減少した（P≦0.02）。

PRINCIPAL FINDINGS: Lower MASP-3 and MAp44 levels were observed in patients, compared with controls (P = 0.0002 and P<0.0001, respectively) and in lepromatous, compared with non-lepromatous patients (P = 0.008 and P = 0.002, respectively). Higher MASP-3 levels were present in controls carrying variants/haplotypes associated with leprosy resistance (rs13064994*T, rs1109452_rs850314*CG within GT_CCG and rs850314*A: OR = 0.5-0.6, Pcorr = 0.01-0.04). Controls with rs1109452*T, included in susceptibility haplotypes (GT_GTG/GT_CTG: OR = 2.0, Pcorr = 0.03), had higher MASP-1 and lower MASP-3 levels (P≤0.009). Those with GC_CCG, presented increasing susceptibility (OR = 1.7, Pcorr = 0.006) and higher MAp44 levels (P = 0.015). MASP-3 expression decreased in patients, compared with controls carrying rs1109452_rs850314*CA or CG (P≤0.02), which may rely on exon 12 CpG methylation and/or miR-2861/miR-3181 mRNA binding.

結論:

血清中のMASP-3/MAp44の利用可能性を調節する多型がハンセン病の感受性を調節していることから、宿主マクロファージに寄生するために貪食を利用する病原体に対するレクチン経路の調節が重要であることが明らかになった。

CONCLUSION: Polymorphisms regulating MASP-3/MAp44 availability in serum modulate leprosy susceptibility, underlining the importance of lectin pathway regulation against pathogens that exploit phagocytosis to parasitize host macrophages.