シスプラチン抵抗性卵巣がんにおけるILKのダウンストリーム・エフェクター

Downstream Effectors of ILK in Cisplatin-Resistant Ovarian Cancer.

• Jeyshka M Reyes-González
• Blanca I Quiñones-Díaz
• Yasmarie Santana
• Perla M Báez-Vega
• Daniel Soto
• Fatima Valiyeva
• María J Marcos-Martínez
• Ricardo J Fernández-de Thomas
• Pablo E Vivas-Mejía

抄録

プラチナベースの併用化学療法による第一選択治療では良好な奏効を示したにもかかわらず、ほとんどの卵巣癌患者は再発し、最終的には予後不良のプラチナ耐性疾患を発症することになる。インテグリンリンクドキナーゼ（ILK）が卵巣癌治療の潜在的なターゲットであることが示唆されているが、ILKの下流エフェクターの同定は十分に検討されていない。本研究の目的は、シスプラチン耐性卵巣癌における ILK を標的とした場合の分子的・生物学的効果を調べることであった。ウェスタンブロット分析の結果、シスプラチン耐性卵巣がん細胞では、シスプラチン感受性卵巣がん細胞に比べて ILK のリン酸化レベルが高いことが示された。卵巣癌患者サンプルのさらなる免疫組織化学分析では、正常卵巣上皮と比較して、腫瘍組織中のリン酸化ILKレベルが有意に増加していることが示された。スモールインターフェアリングRNA（siRNA）処理によるILKの標的化は、シスプラチン耐性細胞の増殖・浸潤能を低下させ、アポトーシスを増加させた。ILK-siRNAのトランスフェクション後、Ingenuity Pathway Analysis（IPA）によるRNAシークエンシング（RNA-Seq）による遺伝子発現の差異解析と、Kaplan-Meier plotterデータベースを用いた生存解析により、いくつかのノンコーディングRNAを含む、細胞増殖、アポトーシス、浸潤、転移に関与する複数の標的遺伝子が同定された。以上の結果から、本研究の結果は、ILK が卵巣癌の魅力的なターゲットであることを支持し、予後と治療に価値のある ILK の下流エフェクターの可能性を示唆するものである。

Despite good responses to first-line treatment with platinum-based combination chemotherapy, most ovarian cancer patients will relapse and eventually develop platinum-resistant disease with poor prognosis. Although reports suggest that integrin-linked kinase (ILK) is a potential target for ovarian cancer treatment, identification of ILK downstream effectors has not been fully explored. The purpose of this study was to investigate the molecular and biological effects of targeting ILK in cisplatin-resistant ovarian cancer. Western blot analysis showed that phosphorylation levels of ILK were higher in cisplatin-resistant compared with cisplatin-sensitive ovarian cancer cells. Further immunohistochemical analysis of ovarian cancer patient samples showed a significant increase in phosphorylated ILK levels in the tumor tissue when compared to normal ovarian epithelium. Targeting ILK by small-interfering RNA (siRNA) treatment reduced cisplatin-resistant cell growth and invasion ability, and increased apoptosis. Differential gene expression analysis by RNA sequencing (RNA-Seq) upon ILK-siRNA transfection followed by Ingenuity Pathway Analysis (IPA) and survival analysis using the Kaplan-Meier plotter database identified multiple target genes involved in cell growth, apoptosis, invasion, and metastasis, including several non-coding RNAs. Taken together, results from this study support ILK as an attractive target for ovarian cancer and provide potential ILK downstream effectors with prognostic and therapeutic value.