日本語AIでPubMedを検索
識別とメラノーマ関連網膜症患者の血清からの新規 TRPM1 自己抗体の特徴付け
Identification and characterization of novel TRPM1 autoantibodies from serum of patients with melanoma-associated retinopathy.
PMID: 32324760 PMCID: PMC7179873. DOI: 10.1371/journal.pone.0231750.
抄録
メラノーマ関連網膜症（Melanoma-associated retinopathy：MAR）は、通常、転移性メラノーマに関連して起こる稀な腫瘍性の網膜障害である。患者は、夜盲症、視神経症および視野の狭窄を呈する。MARは網膜タンパク質を標的とした自己抗体の産生によって特徴づけられる自己免疫疾患であり、特にメラノサイトおよびON-双極細胞で産生されるカチオンチャネルTRPM1に反応する自己抗体が特徴である。TRPM1は、タンパク質のN末端領域で異なる少なくとも3つの異なるアイソフォームを有している。本研究では、TRPM1の3つのアイソフォームに対して異なる抗TRPM1自己抗体を示す3人の新規MAR患者の症例を報告した。2つの血清はTRPM1のすべてのアイソフォームを認識したが、1つの血清は過剰発現細胞の免疫局在化研究で2つの最も長いアイソフォームのみを認識した。同様に、前者の2つの血清はウエスタンブロット上ですべてのTRPM1アイソフォームと反応したが、後者の血清ではすべてのアイソフォームを検出するために免疫沈降濃縮ステップが必要であった。対照的に、すべての血清はTprm1+/+ではON-bipolar細胞を標識したが、Trpm1-/-マウスの網膜では共免疫局在化によって示されたようにON-bipolar細胞を標識しなかった。このことは、MAR血清がTRPM1を特異的に検出していることを確認している。最も可能性が高いのは、異なる患者の抗TRPM1自己抗体は、親和性と濃度が異なることである。さらに、TRPM1に対する自己抗体の結合は、いくつかの構築物（切り詰められたポリペプチド対完全長TRPM1）またはアプリケーション（ウェスタンブロッティング対免疫組織化学）ではアクセスできないエピトープで、コンフォメーションに依存している可能性があります。したがって、我々は、MAR患者の血清中の抗TRPM1自己抗体の存在を検査するために、異なる方法の組み合わせを使用することを提案する。
Melanoma-associated retinopathy (MAR) is a rare paraneoplastic retinal disorder usually occurring in the context of metastatic melanoma. Patients present with night blindness, photopsias and a constriction of the visual field. MAR is an auto-immune disorder characterized by the production of autoantibodies targeting retinal proteins, especially autoantibodies reacting to the cation channel TRPM1 produced in melanocytes and ON-bipolar cells. TRPM1 has at least three different isoforms which vary in the N-terminal region of the protein. In this study, we report the case of three new MAR patients presenting different anti-TRPM1 autoantibodies reacting to the three isoforms of TRPM1 with variable binding affinity. Two sera recognized all isoforms of TRPM1, while one recognized only the two longest isoforms upon immunolocalization studies on overexpressing cells. Similarly, the former two sera reacted with all TRPM1 isoforms on western blot, but an immunoprecipitation enrichment step was necessary to detect all isoforms with the latter serum. In contrast, all sera labelled ON-bipolar cells on Tprm1+/+ but not on Trpm1-/- mouse retina as shown by co-immunolocalization. This confirms that the MAR sera specifically detect TRPM1. Most likely, the anti-TRPM1 autoantibodies of different patients vary in affinity and concentration. In addition, the binding of autoantibodies to TRPM1 may be conformation-dependent, with epitopes being inaccessible in some constructs (truncated polypeptides versus full-length TRPM1) or applications (western blotting versus immunohistochemistry). Therefore, we propose that a combination of different methods should be used to test for the presence of anti-TRPM1 autoantibodies in the sera of MAR patients.