日本語AIでPubMedを検索
白血病抑制因子の過剰発現は子宮内膜癌細胞の化学療法耐性を高める
[Overexpression of leukemia inhibitory factor enhances chemotherapy tolerance of endometrial cancer cells ].
PMID: 32376564 PMCID: PMC7040748. DOI: 10.12122/j.issn.1673-4254.2020.01.04.
抄録
目的:
白血病抑制因子（LIF）の過剰発現が子宮内膜癌細胞のシスプラチンおよびパクリタキセル抵抗性に及ぼす影響を調べる。
OBJECTIVE: To investigate the effect of overexpression of leukemia inhibitory factor (LIF) on cisplatin and paclitaxel resistance of endometrial cancer cells .
方法:
子宮内膜癌細胞株 HEC-1B および RL95-2 に LIF を過剰発現させる組換えレンチウイルスを感染させ、RT-qPCR および ELISA を用いて LIF 発現の変化を検証した。LIF過剰発現細胞の生存率をCCK-8アッセイを用いて評価し、シスプラチンまたはパクリタキセル治療に対する細胞のアポトーシスおよびミトコンドリア膜電位の変化を、それぞれアネキシンV-FITC/PI染色およびJC-1アッセイを用いて解析した。LIF過剰発現がBcl-2ファミリータンパク質およびSTAT3経路の発現に及ぼす影響をウェスタンブロッティングを用いて評価した；STAT3の転写活性を検出するためにデュアルルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイを用いた。シスプラチンまたはパクリタキセルで誘導されたLIF過剰発現細胞のアポトーシスに対するSTAT3サイレンシングの効果を調べた。
METHODS: Endometrial cancer cell lines HEC-1B and RL95-2 were infected with a recombinant lentivirus to overexpress LIF, and the changes in LIF expression was verified using RT-qPCR and ELISA. The viability of the LIF-overexpressing cells was assessed using CCK-8 assay, and the cell apoptosis and changes in mitochondrial membrane potential in response to cisplatin or paclitaxel treatment were analyzed with annexin V-FITC/PI staining and JC-1 assay, respectively. The effect of LIF overexpression on the expressions of Bcl-2 family proteins and STAT3 pathway was evaluated using Western blotting; dual-luciferase reporter gene assay was employed to detect the transcriptional activity of STAT3. The effect of STAT3 silencing on apoptosis of the LIF-overexpressing cells induced by cisplatin or paclitaxel was investigated.
結果:
組換えレンチウイルスを感染させた細胞株では、細胞生存率に明らかな変化は見られなかったが、LIFのmRNAとタンパク質レベルが有意に増加した（<0.05）。LIFの過剰発現は、シスプラチンまたはパクリタキセルによる子宮内膜癌細胞のアポトーシスを有意に減少させ（<0.05）、細胞のミトコンドリア膜電位を有意に増加させた（<0.05）。Bcl-2、Bcl-xLおよびp-STAT3タンパク質の発現は、Bax、BadおよびSTAT3のいずれかの発現が減少しているか、またはLIF過剰発現細胞では明らかな変化を示していない間、明らかに増加した。LIFを過剰発現させると、STAT3の転写活性が有意に増加し（<0.05）、STAT3をサイレンシングすると、明らかにLIFを過剰発現させる子宮内膜癌細胞のアポトーシスが増加した（<0.05）。
RESULTS: The cell lines infected with the recombinant lentivirus showed significantly increased mRNA and protein levels of LIF ( < 0.05) without obvious changes in the cell viability (>0.05). LIF overexpression significantly attenuated cisplatin-or paclitaxel-induced apoptosis of the endometrial cancer cells ( < 0.05) and markedly increased mitochondrial membrane potential of the cells ( < 0.05). The expressions of Bcl-2, Bcl-xL and p-STAT3 proteins increased obviously while the expressions of Bax, Bad and STAT3 either decreased or showed no obvious changes in the LIF-overexpressing cells. Overexpressing LIF significantly enhanced the transcriptional activity of STAT3 ( < 0.05), and silencing STAT3 obviously enhanced apoptosis of the endometrial cancer cells overexpressing LIF ( < 0.05).
結論:
LIF の過剰発現は子宮内膜癌細胞に対するシスプラチンおよびパクリタキセル耐性を増強する可能性がある。
CONCLUSIONS: s Overexpression of LIF can enhance cisplatin and paclitaxel resistance to endometrial cancer cells .