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凍結精子症の男性からの射精精精子を3個以下にするための改良透過性凍結精子無添加ガラス固化法と、この方法で生まれた14人の子供の7年間の追跡調査
Modified permeable cryoprotectant-free vitrification method for three or fewer ejaculated spermatozoa from cryptozoospermic men and 7-year follow-up study of 14 children born from this method.
PMID: 32383453 DOI: 10.1093/humrep/deaa072.
抄録
研究の質問:
また、この技術の後に生まれた子供の身体的・認知的発達は正常なのでしょうか？
STUDY QUESTION: What technique can be used to successfully cryopreserve three or fewer ejaculated spermatozoa from cryptozoospermic men and is the physical and cognitive development of children born after this technique normal?
サマリー・アンサー:
凍結精子症の男性から採取した 3 個以下のヒト精子の修正凍結保存法では、95%以上の回収率と 90%弱の生存率が得られ、顕微授精後に生まれた子供の身体能力と認知能力は、自然妊娠後に生まれた子供に匹敵することがわかった。
SUMMARY ANSWER: The modified cryopreservation method for three or fewer human spermatozoa from cryptozoospermic men showed a recovery rate above 95% and a survival rate just under 90%, and the physical and cognitive abilities of the children born after ICSI were comparable to those born after natural conception.
これまでに知られていること:
凍結精子症男性の射精精精子を用いた顕微授精の臨床成績は、Microsurgical精巣精子摘出術（Micro-TESE）の精巣精子よりも射精精精子の方がDNA断片化率が高いため、精巣精子を用いた顕微授精に比べて劣ると考えられている。
WHAT IS KNOWN ALREADY: Clinical outcomes of ICSI using cryptozoospermic men's ejaculated spermatozoa are considered to be inferior to that using testicular spermatozoa from microsurgical testicular sperm extraction (Micro-TESE), possibly because the DNA fragmentation rate is higher in ejaculated spermatozoa than in testicular spermatozoa from Micro-TESE.
デザイン、サイズ、期間:
聖母クリニックにおいて、3個以下の精子の凍結保存の効率性の評価をレトロスペクティブに行った。2011年から2018年までの間に、この方法で生まれた子供の身体的・認知的発達を調査した。
STUDY DESIGN, SIZE, DURATION: Evaluation of the efficiency of cryopreservation of three or fewer spermatozoa was conducted retrospectively at St. Mother Clinic. The physical and cognitive development of children born after this method was studied between 2011 and 2018.
参加者／素材、設定、方法:
この研究では、遠心分離後の射精液中に形態学的に正常で運動性のある精子が3個以下で、Micro-TESEよりも凍結保存された精子を使用することを好む凍結精子症の男性28人が含まれていた。対照群は、射精液中の新鮮な精子を使用している凍結保存精子症患者31人と、TESEで得られた精子が10個未満でガラス固化している非閉塞性無精子症患者20人であった。射精液からのガラス化精子、射精液からの新鮮精子、精巣からのガラス化精子の3つのグループ間の臨床転帰を統計学的に分析した。射精後のガラス化精子を用いた顕微授精後に生まれた14人の子供の7年間の追跡調査では、日本政府が発行した「母子手帳」と「キンダー乳児発達スケール（KIDSスケール）」を用いて、子供の身体的および認知的発達が自然妊娠した子供と同等であるかどうかを判断した。
PARTICIPANTS/MATERIALS, SETTING, METHODS: This study included 28 cryptozoospermic men who had three or fewer morphologically normal and motile spermatozoa in their ejaculate after centrifugation and who preferred using cryopreserved spermatozoa to Micro-TESE. Control subjects were 31 cryptozoospermic patients using fresh spermatozoa from their ejaculates and 20 non-obstructive azoospermic patients with fewer than 10 spermatozoa obtained by TESE and vitrified. Clinical outcomes among three groups, vitrified spermatozoa from the ejaculate, fresh spermatozoa from the ejaculate and vitrified spermatozoa from the testis, were statistically analysed. For the 7-year follow up study of the 14 children born after ICSI using the ejaculated vitrified spermatozoa, the Japanese government-issued Boshi Kenko Techo (Mother-Child Handbook) and Kinder Infant Development Scale (KIDS scale) were used to determine whether their physical and cognitive development was comparable to that of naturally conceived children.
主な結果とチャンスの役割:
回復率および生存率は、射精からのガラス化精子が97.8％（510/521）および87.1％（444/510）、精巣からのガラス化精子が92.7％（152/164）および60.5％（92/152）であった。3群間の臨床妊娠（％）、流産（％）および出生率（％）は、それぞれ以下の通りであった：射精由来のガラス化精子。射精由来の生精子：15(25.0)、2(13.3)、13(21.7)、射精由来の生精子：26(24.3)、5(19.2)、20(18.7)、精巣由来のガラス化精子：3(16.7)、0(0.0)、3(16.7)であった。両群間では、精巣からのガラス化精子の方が射精液からのガラス化精子よりも精巣からのガラス化精子の方が精子生存率と卵子受精率が低かった以外は、統計的に有意な差は認められなかった。7年間の追跡調査では、射精液からのガラス化精子を用いた顕微授精後に生まれた14人の子供の身体的および認知的発達は、自然妊娠した子供に匹敵することが示されました。
MAIN RESULTS AND THE ROLE OF CHANCE: Recovery and survival rates were 97.8% (510/521) and 87.1% (444/510) for vitrified spermatozoa from the ejaculate and 92.7% (152/164) and 60.5% (92/152) for vitrified spermatozoa from the testis. Clinical pregnancies (%), miscarriages (%) and live birth rates (%), respectively, among the three groups were as follows: vitrified spermatozoa from the ejaculate: 15(25.0), 2(13.3), 13(21.7); fresh spermatozoa from the ejaculate: 26(24.3), 5(19.2), 20(18.7); and vitrified spermatozoa from the testis: 3(16.7), 0(0.0), 3(16.7). Among the groups, there were no statistically significant differences except for the sperm survival rate and the oocyte fertilisation rate, which were lower for vitrified spermatozoa from the testis compared with vitrified spermatozoa from the ejaculate. The 7-year follow-up study showed that the physical and cognitive development of 14 children born after ICSI using vitrified ejaculated spermatozoa from the ejaculate was comparable to that of naturally conceived children.
制限、注意の理由:
この方法が正常に適用できる精子の最大数は10個程度である。10個を超えると、吸引された精子の一部が吸引ピペット内で衝突して方向を変えて鉱物油に到達し、一度そうなるとピペットから排出することができなくなります。DNAの断片化の証拠を見つけられなかったとしても、より多くの参加者数とより長い期間でのさらなる研究が必要である。
LIMITATIONS, REASONS FOR CAUTIONS: The maximum number of spermatozoa to which this method can be applied successfully is about 10. When the number of aspirated spermatozoa is over 10, some of them change direction after colliding with each other inside the aspiration pipette and reach the mineral oil, and once this happens, they cannot be expelled out of the pipette. Even though we did not find evidence of DNA fragmentation, further studies with larger participant numbers and longer time periods are necessary.
この結果のより広い意味での影響:
この技術は、Micro-TESEの介入を回避または軽減するために、非常に少数の精巣精子の凍結保存（10個未満）に非常に有用である。
WIDER IMPLICATIONS OF THE FINDINGS: This technique is very useful for the cryopreservation of very small numbers of testicular spermatozoa (fewer than 10) in order to avoid or reduce Micro-TESE interventions.
研究資金／競合する利益:
この研究を実施するために外部からの資金提供は受けていない。競合する利害関係もない。
STUDY FUNDING/COMPETING INTEREST(S): No external funding was received to undertake this study. There are no competing interests.
トライアル登録番号:
該当なし。
TRIAL REGISTRATION NUMBER: N/A.
© The Author(s) 2020. Published by Oxford University Press on behalf of the European Society of Human Reproduction and Embryology. All rights reserved. For permissions, please e-mail: journals.permissions@oup.com.