miRNA-574-3pによって制御されたアドレノメデュリンは、気管支肺異形成の未熟児を保護する

Adrenomedullin regulated by miRNA-574-3p protects premature infants with bronchopulmonary dysplasia.

• Xiaohui Gong
• Jiajun Qiu
• Gang Qiu
• Cheng Cai

抄録

気管支肺異形成（BPD）は、未熟児に最も多い慢性肺疾患（CLD）である。本研究では、BPD の病態形成過程におけるアドレノメデュリン（ADM）上の miRNA-547-3p の制御を解明することを目的としました。Agilent Human 4x44K Gene Expression Microarrays v2 と miRCURY LNA™ microRNA Array を用いて、発現の異なる miRNA とその潜在的な標的遺伝子を同定し、ルシフェラーゼレポーター遺伝子解析により再認証しました。第一に2つのデータベースに共存していること、第二に差異を発現していること、そしてルシフェラーゼレポーター遺伝子解析により標的遺伝子を同定することの2つの条件を満たした標的遺伝子のみを保持した。そこで、miRNA-574-3pとその標的遺伝子ADMを選択して研究を進めた。BPD を有する未熟児における miRNA-574-3p とその標的遺伝子 ADM の発現をリアルタイム q-PCR を用いて決定した。マイクロアレイを用いてBPDサンプルと非BPDサンプルを解析したところ、BPDサンプルと非BPDサンプルの間には516個の異なる発現を示すプローブが存在することがわかった。516個の異なる発現を示すプローブには、アップレギュレーションされた408個のプローブとダウンレギュレーションされた108個のプローブが含まれていた。BPD乳児の血液サンプルをリアルタイムq-PCRで検出したところ、miRNA-574-3pの発現は低下しているが、ADMの発現は有意に増加していることがわかった。ルシフェラーゼレポーター遺伝子解析の結果、hsa-miR-574-3pはADM 3'UTRでルシフェラーゼの発現を調節し、61.84%減少させることがわかった。ADMがBPDの未熟児を保護することが文献で報告されている。miRNA-574-3pの標的遺伝子ADMは、BPDの予防・治療に貢献する可能性がある。

Bronchopulmonary dysplasia (BPD) is the most common chronic lung disease (CLD) in premature infants. The present study was designed to elucidate the regulation of miRNA-547-3p on adrenomedullin (ADM) during the pathogenesis of BPD. We used Agilent Human 4x44K Gene Expression Microarrays v2 and miRCURY LNA™ microRNA Array to identify the differently expressed miRNA and its potential target genes, and certified them again by luciferase reporter gene analysis. We only retained target genes that met the following two conditions: first, coexisting in two databases, and second, expressing differences, and then identifying target genes by luciferase reporter gene analysis. Thus, we selected miRNA-574-3p and its target gene ADM for further research. We used real-time q-PCR to determine the expression of miRNA-574-3p and its target gene ADM in premature infants with BPD. We used microarray expression to analyze BPD samples and non-BPD samples and found that there were 516 differently expressed probes between them. The 516 differently expressed probes included 408 up-regulated probes and 108 down-regulated probes. The blood samples of BPD infants were detected by real-time q-PCR and found that the expression of miRNA-574-3p was decreased, while the expression of ADM was significantly increased. Luciferase reporter gene analysis showed that hsa-miR-574-3p can regulate the expression of luciferase with ADM 3'UTR, and decrease it by 61.84%. It has been reported in the literature that ADM can protect the premature infants with BPD. The target gene ADM of miRNA-574-3p may contribute to the prevention and treatment of BPD.

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