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調整可能な逆流電気浸透流とPAMAPTACコーティングされた毛細血管内の麻酔薬ケタミンとその誘導体の分離
Separation of anaesthetic ketamine and its derivates in PAMAPTAC coated capillaries with tuneable counter-current electroosmotic flow.
PMID: 32498904 DOI: 10.1016/j.talanta.2020.121094.
抄録
ケタミン、ノルケタミン、ヒドロキシノルケタミンおよびデヒドロノルケタミンのキャピラリー電気泳動分離は、反対方向の電気浸透流の影響下で逆流体制で行われた。この目的のために、溶融シリカキャピラリーを、ポリ(アクリルアミド-コ-3-アクリルアミドプロピルトリメチルアンモニウムクロリド)コポリマー(PAMAPTAC)で共有結合的にコーティングした。重合混合物中のカチオン性モノマーAPTACの含有量は、0〜6mol.重要なことに、それはケタミン/ノルケタミンの改善された電気泳動分解能をもたらし、それは中性のPAMコーティング(すなわち、0%のPAMAPTAC)のための0.8から6%のPAMAPTACのための3.0に増加した。ラット血清中のケタミンおよびその誘導体の定量は、内径25μmの4% PAMAPTACキャピラリーで行った。分離は500mMの酢酸水溶液(pH2.3)中で行った。血清にアセトニトリルを添加して脱蛋白化した臨床サンプルを、大量の処理サンプルを直接キャピラリーに注入した。検出限界はデヒドロノルケタミンで2.2ng/mLからヒドロキシノルケタミンで4.1ng/mLまでであり,日内再現性は移行時間で1.0~1.5%,ピーク面積で2.8~3.3%であった.開発した方法は、体重1gあたり2μgの低用量の麻酔薬を静脈内投与した後のラット血清中のケタミンの時間モニタリングに採用した。
Capillary electrophoretic separation of ketamine, norketamine, hydroxynorketamine, and dehydronorketamine was performed in the counter-current regime under the influence of oppositely-directed electroosmotic flow. For this purpose, the fused silica capillaries were covalently coated with the poly(acrylamide-co-3-acrylamidopropyl trimethylammonium chloride) copolymer (PAMAPTAC). The content of the cationic monomer APTAC in the polymerization mixture varied in the range 0-6 mol. % and the generated electroosmotic flow increased continuously in the 0-20 · 10 mVs interval. Importantly, it resulted in improved electrophoretic resolution of ketamine/norketamine, which increased from 0.8 for neutral PAM coating (i.e. 0% PAMAPTAC) to 3.0 for 6% PAMAPTAC. The determination of ketamine and its derivates in rat serum was performed in a 4% PAMAPTAC capillary with an inner diameter of 25 μm. The separation was performed in a 500 mM aqueous solution of acetic acid (pH 2.3). The clinical sample was deproteinized by the addition of acetonitrile to the serum and a large volume of the treated sample was injected directly into the capillary. The achieved limit of detection ranged from 2.2 ng/mL for dehydronorketamine to 4.1 ng/mL for hydroxynorketamine; the intra-day repeatability was 1.0-1.5% for the migration time and 2.8-3.3% for the peak area. The developed methodology was employed for time monitoring of ketamines in rat serum after intra venous administration of low doses of anaesthetic at a level of 2 μg per g of body weight.
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