UHPLC-MS/MSによるラット血漿中の大黄ゼチョンピルの19種類の化合物の同時測定と薬物動態研究への応用

Simultaneous determination of nineteen compounds of Dahuang zhechong pill in rat plasma by UHPLC-MS/MS and its application in a pharmacokinetic study.

• Li Wu
• Shali Du
• Furong Yang
• Zihui Ni
• Zhipeng Chen
• Xiao Liu
• Yulan Wang
• Qigang Zhou
• Weidong Li
• Kunming Qin

抄録

大黄ゼチョンピル（DHZCP）は、肝臓病の治療に広く使用されている有名な伝統的な漢方薬の処方である。しかし、動的なDHZCPプロファイルの欠如のために、この薬内の有効成分のin vivo薬物動態は不明のままである。この論文では、迅速、高感度で信頼性の高いUHPLC-MS/MS法を使用して、ラット血漿中のDHZCPの19の特徴的な構成要素の含有量を決定するために、レヒン、エモジン、クリソファノール、フィジオン、アロエモジンを含む使用されました。p-メトキシフェニル酢酸、ヒポキサンチンヌクレオシド、ウォゴニン、ウォゴノシド、バイカリン、ノルウォゴニン、ナリンゲニン、ナツメグ酸、パイオニフローリン、バーバコシド、ロディオラグルコシド、フォーシトシドA、フォルモノネチン、グリチルリチン酸。Agilent Extend-Cカラム(2.1mm×100mm、1.8μm)を用いて、(A)0.1%ギ酸と(B)アセトニトリルのモバイルフレーズで19の特徴的な成分を分離した。成分は、多重反応モニタリング(MRM)を用いて、マイナスイオンモードで検出した。確立されたUHPLC-MS/MS法は良好な直線性を有し、決定係数(r)は>0.99であった。日中及び日中精度は12%以下であり、精度は-9.56%から7.82%であった。安定性、抽出回収率、マトリックス効果は要件を満たしていた。この方法は、DHZCPの経口投与後のこれらの19の特徴的な成分の薬物動態学的研究にうまく適用された。UHPLC-MS/MSはDHZCPの特徴的な化学成分の薬物動態を研究するのに初めて使用され、その薬力学的基礎のさらなる解明のための参照と理論的指針を提供した。

Dahuang zhechong pill (DHZCP) is a famous traditional Chinese medicine prescription, which is widely used in the treatment of liver diseases. However, due to the lack of a dynamic DHZCP profile, the in vivo pharmacokinetics of active ingredients within this medicine remains unknown. In this paper, a rapid, sensitive and reliable UHPLC-MS/MS method was used to determine the content of 19 characteristic constituents of DHZCP in rat plasma, including rhein, emodin, chrysophanol, physcion, aloeemodin, p-methoxyphenylacetic acid, hypoxanthine nucleoside, wogonin, wogonoside, baicalin, norwogonin, naringenin, nutmeg acid, paeoniflorin, verbascoside, rhodiola glucoside, forsythoside A, formononetin, and glycyrrhizic acid. An Agilent Extend-C column (2.1 mm × 100 mm, 1.8 μm) was used to separate the 19 characteristic constituents, with a mobile phrase of (A) 0.1% formic acid and (B) acetonitrile. The constituents were detected in negative ion mode with multiple reactions monitoring (MRM). The established UHPLC-MS/MS method had good linearity, with a coefficient of determination (r) of >0.99. The daytime and intra-day precision were less than 12%, and the accuracy ranged from -9.56% to 7.82%. The stability, extraction recovery, and matrix effect met the requirements. The method was successfully applied to the pharmacokinetic study of these nineteen characteristic constituents after oral administration of DHZCP. UHPLC-MS/MS was used for the first time to study the pharmacokinetics of the characteristic chemical constituents in DHZCP, which provided reference and theoretical guidance for further clarification of its pharmacodynamic basis.

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