P53 誘導 MRVI1 は大腸がんの発がんを媒介する

P53-induced MRVI1 mediates carcinogenesis of colorectal cancer.

• Liang Ma
• Haitao Wang
• Yao Sun
• Dawei Yang
• Lei Pu
• Xin Zhang

抄録

大腸がん（CRC）は、世界的に最も有病率の高いがんの一つである。現在、CRC の診断と治療法が進歩しているにもかかわらず、CRC の罹患率と死亡率は上昇している。本研究では、CRCの新たな発症機序を探るために、CRCにおけるマウスレトロウイルス統合部位1（MRVI1）の発現パターンと機能メカニズムに着目しました。CRC 患者から腫瘍組織と隣接する正常組織を採取し、RT-PCR とウェスタンブロットを用いて MRVI1 の発現量を測定した。MRVI1のノックダウンは、HCT116およびHT29細胞においてshRNAを用いて達成され、次いで、細胞増殖を検出するためのCCK-8アッセイ、および細胞のアポトーシスを検出するためのヌクレオソームELISAアッセイと組み合わせたカスパーゼ-3活性アッセイを用いた。トランスウェルアッセイは細胞浸潤を検出するために用いられ、ルシフェラーゼレポーターアッセイはp53によるMRVI1プロモーターの活性化を検証するために用いられた。MRVI1はCRC組織およびいくつかのCRC細胞株でダウンレギュレートされていた。MRVI1 のノックダウンは、CRC 細胞の増殖とアポトーシスを促進し、浸潤と幹細胞化を促進した。メカニズム研究の結果、MRVI1はその上流でp53により転写活性化されていることが明らかになった。また、p53によるCRCの予後阻害はMRVI1に依存していた。MRVI1 は p53 の活性化が関与するメカニズムで CRC の予後を抑制した。MRVI1はCRCの臨床診断や治療のターゲットとなる可能性がある。

Colorectal cancer (CRC) is one of the most prevalent cancer types worldwide. Despite the advancements in current diagnosis and treatment strategies of CRC, the incidence and mortality rates of CRC have been rising. To explore novel mechanism of CRC, this study focused on the expression pattern and functional mechanism of murine retrovirus integration site 1 (MRVI1) in CRC. Tumor tissues and adjacent normal tissues were collected from CRC patients, and the expression levels of MRVI1 were determined by RT-PCR and Western blot. MRVI1 knockdown was achieved by shRNA in HCT116 and HT29 cells, followed by CCK-8 assay to detect the cell proliferation, and caspase-3 activity assay combined with nucleosome ELISA assay to detect cell apoptosis. Transwell assay was used to detect cell invasion and luciferase reporter assay was used to validate the activation of the MRVI1 promoter by p53. MRVI1 was downregulated in CRC tissues and several CRC cell lines. Knockdown of MRVI1 enhanced the proliferation and apoptosis, while promoted invasion and stemness of CRC cells. Mechanism study revealed that MRVI1 was transcriptionally activated by p53 at its upstream. In addition, p53-induced inhibition of CRC prognosis depended on MRVI1. MRVI1 inhibited the prognosis of CRC a mechanism involving p53 activation. MRVI1 could serve as a potential target for clinical diagnosis and treatment of CRC.