マイクロRNA-379-5p/YBX1 軸は細胞の EMT を制御し、上咽頭癌細胞の遊走と浸潤を抑制することを明らかにした

MicroRNA-379-5p/YBX1 Axis Regulates Cellular EMT to Suppress Migration and Invasion of Nasopharyngeal Carcinoma Cells.

• Fei Zhang
• Chuanxin Duan
• Shucheng Yin
• Ying Tian

抄録

背景:

上皮間葉転換（EMT）は、上咽頭癌（NPC）の転移を調節する主要なアクターである。マイクロRNA（miRs）がEMTプログラムの重要な制御因子であることが明らかになってきています。しかし、miR-379-5pがどのような役割を果たしているのか、また、どのようなメカニズムでNPC細胞のEMTを制御しているのかは明らかにされていません。

Background: Epithelial-mesenchymal transition (EMT) is a major actor modulating the metastasis of nasopharyngeal carcinoma (NPC). Increasing evidence indicates that microRNAs (miRs) are the important regulators of EMT program. However, the potential roles and underlying mechanisms of miR‑379-5p in regulating EMT of NPC cells remain unclear.

方法:

ヒトNPC組織および細胞株におけるmiR-379-5p発現量を定量的リアルタイムPCR（qRT-PCR）により検出した。その後、NPC組織におけるmiR-379-5p発現量と臨床病理学的特徴および患者の予後との相関を解析した。NPC細胞におけるEMTマーカーの発現に対するmiR-379-5pの効果をウエスタンブロットとqRT-PCRで評価した。NPC細胞の遊走および浸潤は、Transwell migrationおよびinvasion assaysにより、それぞれin vitroで評価した。また、miR-379-5p の標的は、公開されている 3 つのデータベースを用いて予測され、さらに dual-luciferase reporter assay、qRT-PCR、Western blot を用いて検証された。

Methods: miR-379-5p expression levels in human NPC tissues and cell lines were detected via quantitative real-time PCR (qRT-PCR). Then, the correlations between miR-379-5p expression in NPC tissues and clinicopathologic features and patients' prognosis were analyzed. The effect of miR-379-5p on the expression of EMT markers in NPC cells was evaluated by Western blot and qRT-PCR. NPC cells' migration and invasion were evaluated in vitro by Transwell migration and invasion assays, respectively. The target of miR-379-5p was predicted with three publicly available databases and further validated with dual-luciferase reporter assay, qRT-PCR, and Western blot.

研究成果:

NPC組織ではmiR-379-5pの発現が有意に低下し、その低発現はNPC患者の複数の好ましくない臨床病理学的因子や予後不良と有意に関連していた。一方、miR-379-5pはNPC細胞株でダウンレギュレーションされ、そのエキゾチックな発現はEMTを阻害してNPC細胞の遊走と浸潤を減少させた。さらに、Y-box binding protein 1 (YBX1)がmiR-379-5pの直接の標的であることが確認され、YBX1の発現を回復させることで、NPC細胞のEMT、遊走、浸潤に対するmiR-379-5pの抑制効果を逆転させることができた。

Results: The expression of miR-379-5p was significantly decreased in NPC tissues, and its low expression was significantly associated with multiple unfavorable clinicopathological factors and poor prognosis of NPC patients. Meanwhile, miR-379-5p was downregulated in NPC cell lines, and its exotic expression inhibited EMT to reduce the migration and invasion of NPC cells. Furthermore, Y-box binding protein 1 (YBX1) was identified and validated as a direct target of miR-379-5p, and restoring YBX1 expression could reverse the inhibitive effect of miR-379-5p on NPC cell EMT, migration and invasion.

結論:

以上の結果から、miR-379-5pは上皮間葉転換（EMT）を阻害し、YBX1の発現を転写後に抑制することで、NPC細胞の遊走・浸潤能力を低下させることが明らかになり、NPC患者の新たな治療標的となる可能性が示唆された。

Conclusion: Taken together, our findings indicate that miR-379-5p inhibits the EMT of NPC cells to reduce their migration and invasion abilities by post-transcriptionally suppressing YBX1 expression, providing a novel potential treatment target for NPC patients.

© 2020 Zhang et al.