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アヒルTLR7の分子クローニング、組織分布、機能解析
Molecular cloning, tissue distribution and function analysis of duck TLR7.
PMID: 32609043 DOI: 10.1080/10495398.2020.1784186.
抄録
トール様受容体（TLR）は、病原体関連分子パターン（PAMP）の検出に重要な役割を果たしています。TLRの中でも、TLR7は抗ウイルス化合物や一本鎖RNAの認識に関与している。本研究では、鳥インフルエンザウイルスの天然宿主であるアヒル()のTLR7の構造と機能を調べることを目的とした。まず、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（RT-PCR）とcDNA末端の迅速増幅（RACE）を用いて、紹興産卵鴨TLR7（duTLR7）の全長cDNAを得た。これは、38塩基対（bp）の5'-非翻訳領域（UTR）、187bpの3'-UTR、および3270bpのオープンリーディングフレームから構成され、1089アミノ酸残基の単一タンパク質をコードしていた。DuTLR7は他の脊椎動物のTLR7遺伝子と高い同一性を共有している。健康なアヒルでは、duTLR7転写物は様々な組織で広く発現しており、肝臓、腎臓、胸腺での発現レベルが高かった。duTLR7 の相対的な発現レベルが最も高いのは、R848 刺激であった。さらに、poly(I:C)刺激によるduTLR7の過剰発現は、IFN-β、NF-κB、IRF7、TRIF、Mx、STAT1およびSTAT2の発現を有意に促進した。これらの結果は、TLR7がアヒルの自然免疫応答において重要な役割を果たしている可能性を示唆しています。
Toll-like receptors (TLRs) play an important role in detecting pathogen-associated molecular patterns (PAMPs). Among the TLRs, TLR7 is involved in the recognition of antiviral compounds and single-stranded RNA. This study was designed to explore the structure and function of TLR7 in duck (), a natural host for avian influenza virus. Firstly, the full-length cDNA of Shaoxing egg-laying duck TLR7 (duTLR7) was obtained using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and rapid amplification of cDNA ends (RACE). It consisted of 38 base pairs (bp) 5'-untranslated region (UTR), 187 bp 3'-UTR, and 3270 bp open reading frame that encodes a single protein of 1089 amino acid residues. DuTLR7 shares high identity with TLR7 genes from other vertebrates. In healthy ducks, duTLR7 transcripts were broadly expressed in different tissues, with higher expression levels in the liver, kidney, and thymus. The highest relative transcript level of duTLR7 could be induced with R848 stimulation. In addition, overexpression of duTLR7 by stimulating with poly(I:C) significantly promoted IFN-β, NF-κB, IRF7, TRIF, Mx, STAT1 and STAT2 expressions. Taken together, these results suggest that TLR7 may play an important role in the innate immune response of ducks.