UHPLC-ESI-MS/MSおよびUHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MSによるCaco-2細胞におけるアメントフラボンの輸送および代謝プロファイリング研究

Transport and metabolic profiling studies of amentoflavone in Caco-2 cells by UHPLC-ESI-MS/MS and UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS.

• Baolin Wang
• Yimeng Lu
• Rong Wang
• Shumeng Liu
• Xiaolong Hu
• Hao Wang

抄録

アメントフラボンはビフラボノイドの一種であるが、抗炎症作用、抗酸化作用、抗ウイルス作用、抗腫瘍作用を有している。本研究では、異なる条件下でのアメントフラボンの透過性を測定するために、信頼性と感度の高い新しいUHPLC-ESI-MS/MS法を開発し、UHPLC-Q-TOF-MS/MS法を用いてCaco-2細胞におけるアメントフラボンの代謝物を同定した。その結果、アメントフラボンはCaco-2細胞モデルでは中等度の腸管吸収性を有する化合物と考えられ、その吸収特性は排出トランスポーターの関与を伴わない傍細胞受動浸透とクラスリン介在性エンドサイトーシスに関与している可能性があることが示された。Caco-2細胞モデルでは、アメントフラボンの8種類の代謝物が同定され、主な代謝経路は酸化、還元、メチル化、グルクロニド結合であることが明らかになった。本研究は、腸内でのアメントフラボンの吸収機構や変換機構をより深く理解するための貴重なエビデンスとなります。

Amentoflavone, a kind of biflavonoid existing in several medicinal plants such as Selaginella moellendorfi and Gingko biloba, possesses anti-inflammatory, antioxidant, anti-virus, anti-tumor activities. In the present study, a new reliable and sensitive UHPLC-ESI-MS/MS method was developed to determine the permeability of amentoflavone under different conditions, and its metabolites in Caco-2 cells were identified by means of UHPLC-Q-TOF-MS/MS method. The results showed that amentoflavone could be considered as a compound with moderate intestinal absorption in Caco-2 cell model and its absorption characteristics might be involved in paracellular passive penetration and clathrin-mediated endocytosis with no participation of efflux transporters. Eight metabolites of amentoflavone were identified in Caco-2 cell model, indicating that the main metabolic pathways were oxidation, reduction, methylation and glucuronide conjugation. This study can provide valuable evidence for an in-depth understanding of absorption mechanism and transformation of amentoflavone in the intestine.

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