lncRNA MEG3 のハイパーメチル化は乳がん細胞の化学感受性を損なう

Hypermethylation of lncRNA MEG3 impairs chemosensitivity of breast cancer cells.

• Hongchang Li
• Puhua Wang
• Jiazhe Liu
• Weiyan Liu
• Xubo Wu
• Junbin Ding
• Jie Kang
• Jindong Li
• Jingfeng Lu
• Gaofeng Pan

抄録

背景:

化学抵抗性は乳がん（BC）治療の成功の障壁となっており、lncRNA MEG3はBCの発症に関与していることが報告されています。しかし、低MEG3発現をもたらすMEG3メチル化がBCの進行や化学抵抗性と関連しているかどうかは不明のままであった。

BACKGROUND: Chemoresistance posed a barrier to successful treatment of breast cancer (BC), and lncRNA MEG3 has been documented to implicate in BC development. However, whether MEG3 methylation, which led to low MEG3 expression, was relevant to BC progression and chemoresistance remained uncertain.

方法:

病理学的に確認されたBC患者から374組の腫瘍組織と隣接する正常組織を収集し、MDA-MB-231、Bcap-37、MCF-7、SK-BR-3を含む4つのBC細胞株を購入した。さらに、BC組織や細胞株のメチル化状況を評価するためにメチル化特異的ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）を採用し、MTTアッセイを行うことでBC細胞株の耐薬品性を評価した。同時に、トランスウェルアッセイとスクラッチアッセイを行い、BC細胞株の遊走性と浸潤性を評価した。

METHODS: In the aggregate, 374 pairs of tumor tissues and adjacent normal tissues were collected from pathologically confirmed BC patients, and four BC cell lines, including MDA-MB-231, Bcap-37, MCF-7, and SK-BR-3, were purchased. Moreover, methylation-specific polymerase chain reaction (PCR) was adopted to evaluate the methylation status of BC tissues and cell lines, and chemo-tolerance of BC cell lines was assessed by performing MTT assay. Concurrently, transwell assay and scratch assay were carried out to estimate the migratory and invasive capability of BC cell lines.

結果:

メチル化したMEG3、低発現のMEG3、大きな腫瘍サイズ（2cm以上）、進行したTNMグレードおよびリンパ系転移は、BC患者の予後不良を象徴する可能性があった（P<.05）。さらに、MDA-MB-231細胞株はパクリタキセル、アドリアマイシン、ビノレルビンに対して最も強い抵抗性を示し（P<.05）、MCF-7細胞株は他のどのBC細胞株よりもこれらの薬剤に対して感受性が高いようであった（P<.05）。さらに、pcDNA3.1-MEG3と5-Aza-dCは、MDA-MB-231細胞株とMCF-7細胞株に顕著な感作性を示した(P<.05)。同時に、BC細胞株の増殖および転移は、pcDNA3.1-MEG3および5-Aza-dCの投与により抑制された(P<0.05)。

RESULTS: Methylated MEG3, lowly expressed MEG3, large tumor size (≥2 cm), advanced TNM grade and lymphatic metastasis were potentially symbolic of poor prognosis among BC patients (P < .05). Besides, MDA-MB-231 cell line exhibited the strongest resistance against paclitaxel, adriamycin, and vinorelbine (P < .05), while MCF-7 cell line seemed more sensitive against these drugs than any other BC cell line (P < .05). Furthermore, pcDNA3.1-MEG3 and 5-Aza-dC markedly sensitized MDA-MB-231 and MCF-7 cell lines against the drug treatments (P < .05). Simultaneously, proliferation and metastasis of the BC cell lines were slowed down under the force of pcDNA3.1-MEG3 and 5-Aza-dC (P < .05).

結論:

MEG3のメチル化を防ぐことは、BC細胞の増殖や転移を阻害するため、BCの化学抵抗性を低下させる上で重要であると考えられる。

CONCLUSION: Preventing methylation of MEG3 might matter in lessening BC chemoresistance, owing to its hindering proliferation and metastasis of BC cells.

© 2020 The Authors. Journal of Clinical Laboratory Analysis Published by Wiley Periodicals, Inc.