miR-122ノックアウトマウスにおけるRelBのアップレギュレーションは、肝臓およびマクロファージにおける炎症性ケモカイン/サイトカインレベルの上昇に寄与する

/ /

日本語AIでPubMedを検索

PubMedの提供する医学論文データベースを日本語で検索できます。AI(Deep Learning)を活用した機械翻訳エンジンにより、精度高く日本語へ翻訳された論文をご参照いただけます。

Immunol. Lett..2020 Jul;226:22-30. S0165-2478(20)30346-1. doi: 10.1016/j.imlet.2020.06.015.Epub 2020-07-02.

miR-122ノックアウトマウスにおけるRelBのアップレギュレーションは、肝臓およびマクロファージにおける炎症性ケモカイン/サイトカインレベルの上昇に寄与する

Upregulation of RelB in the miR-122 knockout mice contributes to increased levels of proinflammatory chemokines/cytokines in the liver and macrophages.

Ke-Hsun Hsu
Chin-Wen Wei
Yi-Ru Su
Tung Chou
Yueh-Ling Lin
Fu-Chen Yang
Ann-Ping Tsou
Chia-Lin Hsu
Ping-Hui Tseng
Nien-Jung Chen
Kuo-Shyang Jeng
Chuen-Miin Leu

PMID: 32622933 DOI: 10.1016/j.imlet.2020.06.015.

抄録

目的:

MicroRNA-122（miR-122）は肝臓に最も多く存在するmiRNAであり、肝臓の代謝や腫瘍形成に重要な役割を果たしている。これまでの研究でもmiR-122の抗炎症作用が明らかにされているが、miR-122がどのように炎症を抑制するのかについては比較的知られていない。本研究では、マウスにおける炎症性ケモカイン/サイトカイン産生に対するmiR-122の効果を探索することを目的としている。

OBJECTIVE: MicroRNA-122 (miR-122) is the most abundant miRNA in the liver and it plays an important role in regulating liver metabolism and tumor formation. Previous studies also reveal an anti-inflammatory function of miR-122; however, relatively little is known about the mechanisms by which miR-122 suppresses inflammation. This study aims to search the effect of miR-122 on proinflammatory chemokines/cytokines production in mice.

方法:

遺伝子発現を調べるために、定量的リアルタイムPCR、ウエスタンブロット解析、ELISAを行った。候補遺伝子の3'-UTRに含まれるmiR-122標的部位の検索にはTargetScan, miRanda, microT v3.0を用いた。miR-122標的配列を確認するために、ルシフェラーゼレポーターアッセイおよび部位特異的変異誘発法を適用した。また、腹膜マクロファージおよびマウスにLPSを投与し、炎症反応を評価した。

METHODS: Quantitative real-time PCR, Western blot analysis, and ELISA were performed to examine gene expression. TargetScan, miRanda, and microT v3.0 were used to search for possible miR-122 target sites in the 3'-untranslated regions (3'-UTR) of candidate genes. Luciferase reporter assay and site-directed mutagenesis were applied to verify miR-122 target sequences. LPS was applied to peritoneal macrophages and mice to evaluate inflammatory response.

結果:

miR-122ノックアウトマウスの肝臓では、Ccl2, Ccl4, Ccl20, Cxcl2, Cxcl10などの炎症性ケモカインとRelbの発現が増加した。我々は、RelbをmiR-122の直接の標的として同定した。マウス肝臓でRelbを過剰発現させると、Ccl2、Ccl4、Ccl20、Cxcl2、Cxcl10の発現が増加した。miR-122 KOマウスの腹膜マクロファージはRelBのレベルが高く、LPS刺激後にNF-κBの活性化とTNF-αとIL-6の分泌が増加した。また、マクロファージ細胞株でRelBを過剰発現させると、LPS誘発性TNF-αおよびIL-6産生が増強された。 miR-122 KOマウスは死亡率が大幅に増加し、LPSに対する炎症反応がより強く持続することが示された。

RESULTS: The expression of proinflammatory chemokines, including Ccl2, Ccl4, Ccl20, Cxcl2, and Cxcl10, and Relb in the livers of miR-122 knockout (KO) mice was increased. We identified Relb as a direct miR-122 target. Overexpressing RelB in the mouse liver increased the expression of Ccl2, Ccl4, Ccl20, Cxcl2, and Cxcl10. Peritoneal macrophages from miR-122 KO mice had a higher level of RelB, and they showed a stronger NF-κB activation and more TNF-α and IL-6 secretion after LPS stimulation. Overexpression of RelB in a macrophage cell line augmented LPS-induced TNF-α and IL-6 production. miR-122 KO mice showed a greatly increased mortality rate and generated a stronger and lasting inflammatory response to LPS.

結論:

miR-122を欠失させると、肝臓では炎症性ケモカインとRelBの量が増加した。RelBの増加は、肝臓におけるこれらのケモカインの増加に寄与していると考えられる。興味深いことに、miR-122を欠失させると、マクロファージやマウスのLPSに対する感受性が向上した。我々の結果は、RelBの発現を減少させることが、miR-122が炎症を調節する新たなメカニズムであることを明らかにした。

CONCLUSIONS: Deletion of miR-122 caused an upregulation of proinflammatory chemokines and RelB in the liver. Increased RelB may contribute to increases in these chemokine in the liver. Intriguingly, deletion of miR-122 also enhanced the sensitivity of macrophages and mice to LPS. Our results reveal that reducing RelB expression is a new mechanism by which miR-122 regulates inflammation.