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磁性固相抽出法と液液液抽出法を併用した4種のテトラサイクリン類の紫外検出付HPLCによる定量法の開発と応用
Development and application of magnetic solid phase extraction in tandem with liquid-liquid extraction method for determination of four tetracyclines by HPLC with UV detection.
PMID: 32624594 PMCID: PMC7316915. DOI: 10.1007/s13197-020-04320-w.
抄録
磁性固相抽出法と液液液抽出法を併用することで、4種類のテトラサイクリンの定量を可能とするHPLC-UV法を開発した。テトラサイクリン,オキシテトラサイクリン,クロルテトラサイクリン,ドキシサイクリンの抽出・前濃縮には,水溶性アミノ官能基化マグネタイトナノ粒子(MNP-NH)を吸着剤として用いた。フーリエ変換赤外分光計,透過型電子顕微鏡,X線回折,元素分析技術を用いて物質の特性を評価した。抽出溶媒の容量,吸着剤の量,pH,抽出・脱離時間,溶離液の組成,溶出頻度など、液液-液抽出及び磁気分散型固相抽出法に影響を与える重要なパラメータを検討した。提案した方法は、50.0-2500.0μg L(r=0.9941)の直線的な範囲を示し、再現性(RSD<2.2%, n=3)が良好であった。検出限界は40.0、定量限界は50.0μg Lであり、4種類のテトラサイクリンを添加した乳試料(100.0~200.0μg L)を用いて検証したところ、精度は87.8~107.5%であり、実試料分析への応用が可能であることが確認された。また、他の水溶性吸着剤への応用の可能性も示された。
A novel HPLC-UV method was developed for the determination of four tetracyclines based on magnetic solid phase extraction in tandem with liquid-liquid extraction. The water-soluble amino functionalized magnetite nanoparticle (MNP-NH) was used as an adsorbent for extraction/preconcentration of tetracycline, oxytetracycline, chlortetracycline, and doxycycline from bovine milk samples. Fourier transform infrared spectrometer, transmission electron microscope, X-ray diffraction, and elemental analyze techniques were used to characterize the material. Some key parameters which influence liquid-liquid extraction and magnetic dispersive solid-phase extraction procedure, including volume of extraction solvent, the amount of adsorbent, the pH, extraction and desorption time, the composition of the eluent, and elution frequency were investigated. The proposed method exhibited a linear range of 50.0-2500.0 μg L (r = 0.9941) with and good reproducibility (RSD < 2.2%, n = 3). The limit of detection and quantification were 40.0 and 50.0 μg L. This method was verified using milk sample spiked with four tetracyclines (100.0-200.0 μg L), and accuracies of 87.8-107.5%, which confirmed its applicability in real-sample analysis. The proposed method also shows potential application prospects for other water-soluble adsorbents.
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